[发明专利]PNS细胞系及其使用方法

权利要求书

1．产生条件永生化的大鼠神经嵴干细胞的方法，包括：

(a)将铺在适宜增殖的第一种生长培养基中第一种表面上的大鼠神经嵴细胞用编码选择标记和可调控的生长促进基因的DNA转染；和

(b)将转染细胞传代到适宜附着和增殖的第二种生长培养基中第二种表面上；并由此产生条件永生化的大鼠神经嵴干细胞。

2．权利要求1的方法，其中第一种和第二种表面独立选自含有多聚氨基酸、纤连蛋白、层粘连蛋白、胶原或组织培养塑料中一种或多种的底层。

3．权利要求1的方法，其中生长促进基因是一种癌基因。

4．权利要求3的方法，其中癌基因是v-myc。

5．能够分化成神经元的条件永生化的大鼠神经嵴干细胞。

6．产生条件永生化的背根神经节始祖细胞的方法，包括：

(a)将铺于适宜增殖的第一种生长培养基中第一种表面上的背根神经节始祖细胞用编码选择标记和可调控的生长促进基因的DNA转染；和

(b)将转染细胞传代到适宜附着和增殖的第二种生长培养基中第二种表面上；并由此产生条件永生化的背根神经节始祖细胞。

7．权利要求6的方法，其中背根神经节始祖细胞是大鼠细胞。

8．权利要求6的方法，其中背根神经节始祖细胞是人细胞。

9．权利要求6的方法，其中第一种和第二种表面独立选自含有多聚氨基酸、纤连蛋白、层粘连蛋白、胶原或组织培养塑料中一种或多种的底层。

10．权利要求6的方法，其中生长促进基因是一种癌基因。

11．权利要求10的方法，其中癌基因是v-myc。

12．能够分化成神经元的条件永生化的背根神经节始祖细胞。

13．权利要求12的细胞，其中细胞是经转染的大鼠背根神经节始祖细胞。

14．权利要求12的细胞，其中细胞是经转染的人背根神经节始祖细胞。

15．权利要求12的细胞，其中细胞能够分化成感觉神经元。

16．权利要求12的细胞，其中细胞能够分化成伤害感觉神经元。

17．产生神经元的方法，包括在抑制生长促进基因表达的条件下培养根据权利要求1或6产生的细胞。

18．权利要求17的方法，其中细胞是条件永生化的大鼠或人背根神经节始祖细胞，并且细胞在有一种或多种分化剂的情况下在底层上培养。

19．根据权利要求17的方法产生的神经元。

20．产生神经元的方法，包括在抑制生长促进基因表达的条件下培养权利要求5或12的细胞。

21．权利要求20的方法，其中细胞是条件永生化的大鼠或人背根神经节始祖细胞，并且细胞在有一种或多种分化剂情况下培养。

22．根据权利要求20产生的神经元。

23．鉴定条件永生化的背根神经节始祖细胞能否分化成神经元的方法，包括鉴定在增殖生长条件下是否存在βⅢ-微管蛋白阳性细胞，并由此鉴定细胞能否分化成神经元的步骤。

24．将PNS细胞移植到哺乳动物中的方法，包括给予哺乳动物根据权利要求1或6的方法产生的细胞。

25．将PNS细胞移植到哺乳动物中的方法，包括给予哺乳动物权利要求5或12的细胞。

26．治疗病人的方法，包括给予病人根据权利要求1或6的方法产生的细胞。

27．治疗病人的方法，包括给予病人权利要求5或12的细胞。

28．权利要求27的方法，其中病人患有慢性疼痛和/或特征在于神经退化的病理状况。

29．权利要求28的方法，其中所述病理状况是神经病。