[发明专利]治疗性的血管生成因子及其使用方法

说明书

技术领域

本发明一般涉及诸如多效素(pleiotrophin)的治疗性血管生成因子促进血管生成以治疗包括心血管病的多种适应症的用途。

背景技术

在胚胎和新生儿生长过程中，多肽生长因子对组织的适时发育起着重要的生理作用，因此，它们的表达被严格地调控。相反，在肿瘤细胞系以及实体肿瘤中，多肽生长因子基因的表达失去了控制，Cross和Dexter，细胞，64：271(1991)。

多效素(PTN)是属于肝素结合生长因子家族的分泌型生长因子，Lai等，Biochem.Biophys.Res.Commun.，187：1113-1121(1992)。起初，多效素作为弱的促分裂原纯化自牛子宫和作为轴突突起促进剂纯化自新生大鼠的脑，Milner等，Biochem.Biophys.Res.Commun.，165：1096-1103(1989)；Rauvala，EMBO J.，8：2933-2941(1989)；和Li等，科学，250：1690-1694(1990)。已有人报道从人乳腺癌细胞系的条件培养液中纯化出18-kDa的肝素结合生长因子，Wellstein等，生物化学杂志，267：2582-2587(1992)。已克隆和测序了人，牛和大鼠PTN的cDNA，Fang等，生物化学杂志，267：25889-25897(1992)；Li等(1990)，文献同上；Lai等(1992)，文献同上；Kadomatsu等，Biochem.Biophys.Res.Commun.，151：1312-1318(1988)；Tomomura等，生物化学杂志，265：10765-10770(1990)；Vrios等，Biochem.Biophys.Res.Commun.，175：617-624(1991)；和Li等，生物化学杂志，267：26011-26016(1992)。

PTN属于肝素结合蛋白质家族，该家族中包括midkine(MK)生长因子蛋白。midkine蛋白的氨基酸序列与PTN有约50％的同源性，Kadomatsu等，细胞生物学杂志，110：607-616(1990)；和Kretschmer等，生长因子，5：99-114(1991)。在神经外胚层的发育过程中，PTN和MK蛋白似乎起着一定的作用。成年时，所述基因的生理表达仅出现在神经系统很有限的区域内，Bohlen和Kovesdi，生长因子研究进展.，3：143-157(1991)。

PTN可作为肿瘤中的生长因子起作用。如PCT WO 96/02257(其内容列入本文作为参考)所述，PTN的反义核苷酸已发展成为可以抑制肿瘤形成。在高度血管化的黑素瘤中，PTN的表达提高，PTN支持SW13细胞在软琼脂中生长，Wellstein等，生物化学杂志，267：2582-2587(1992)。纯化自不同来源的PTN被描述成对内皮细胞和上皮细胞和成纤维细胞具有促有丝分裂活性，例见Fang等，生物化学杂志，267：25889-25897(1992)；Kuo等，生物化学杂志，265：18749-18752(1990)；Rauvala，EMBO J.，8：2933-2941(1989)；Merenmies和Rauvala，生物化学杂志.，265：16721-16724(1990)；Li等.，科学，250：1690-1694(1990)；和Milner等，Biochem.Biophys.Res.Commun.，165：1096-1103(1989)。PTN显示出对牛脑毛细血管细胞具有促有丝分裂活性并在兔角膜试验中显示出血管生成活性(Courty等.，Biochem.Biophys.Res.Commun.，180：145-151(1991))。在体外，PTN也显示出可诱导内皮细胞的管形成，Laaroubi等，生长因子，10：89-98(1994)。

已在人乳腺癌样品和人乳腺癌细胞系中检测到PTN mRNA，Fang等，生物化学杂志，267：25889-25897(1992)。也在致癌剂诱导的大鼠乳房肿瘤中检测到PTN，Koyama等，国家癌症学会杂志，48：1671-1680(1972)。还发现其它原发性人癌症和细胞系也能表达PTN，其中包括黑素瘤，头和颈的鳞状细胞癌，成神经细胞瘤和成胶质细胞瘤。根据啮齿动物模型，PTN在非癌状态下受到很严格的调控，仅在脑和生殖道区域表达，Bloch等，Brain Res.Dev.Brain Res.，70：267-278(1992)；和Vanderwinden等，Anat.Embryol.，(Berl)186：387-406(1992)。