[发明专利]HIV疫苗

说明书

                      发明领域

本发明涉及在AIDS治疗中使用的新疫苗，以及它们的生产方法。更具体的说，本发明涉及可以大量生产、不溶细胞、且无毒的疫苗。

                      发明背景

尽管抗病毒治疗取得了最新进展，仍然不能永久治愈AIDS或HIV感染。就提供有效治疗而言，药物治疗是有希望的方向，然而由于副作用、顺应性和费用，进展并不快。综合这些困难的一个事实是，在发展中国家获得这些药物较难，而预测，到2000年90％的HIV感染将发生在这些国家。

由于传染病疫苗已获得的成功，最值得注意的是抗小型痘病毒和脊髓灰质炎病毒的疫苗，寻找AIDS有效疫苗的工作一直继续着。已经尝试了多种方法。大多数HIV-1疫苗研制集中于亚单位疫苗。亚单位疫苗方法的难点在于产生最佳免疫力的能力。现在，仍未确切知道哪些HIV抗原和免疫系统成分是保护免受天然感染所必需的。

早期疫苗试验着眼于基于免疫原(诸如HIV-1包膜蛋白质gp120)的重组亚单位蛋白质。该方法的结果令人失望，虽然采用活的重组病毒和亚单位蛋白质的免疫方案均在一些个体中引起了针对HIV-1包膜的包膜特异性CD8+CTL和中和抗体(E.L.Cooney等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1993,90,1882-1886；M.J.McElrath等人，J.Infect.Dis.,1994,169,41-47；B.S.Graham等人，J.Infect.Dis.,1992,166,244-252；和B.S.Graham等人，J.Infect.Dis.,1993,167,533-537)。

HIV包膜糖蛋白的研究没能提供成功开发疫苗研制的途径。例如，关于HIV-1的gp120，已经发现HIV-1包膜糖蛋白gp120的信号序列(称为HIV-1天然信号序列，NSS)与gp120的分泌情况有关。这方面显示，用马尔他素(mellitin)或IL-3信号序列取代NSS，将导致gp120高水平产生并有效分泌(Y.Li等人，Virology,1994,204,266-278；和Y.Li等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1996,93,9606-9611)。然而，仍未知道HIV-1gp120的信号序列是否在病毒的致病性中发挥作用。

优选的路线是使用完整的灭活病毒疫苗(诸如灭活的脊髓灰质炎病毒疫苗)或减毒的活病毒疫苗(诸如口服脊髓灰质炎疫苗)。不幸的是，该方法在寻找AIDS病毒疫苗的工作中显得太危险，存在潜在的问题，诸如℃utter事故”；即未充分灭活的脊髓灰质炎疫苗导致真实的临床脊髓灰质炎。一种以前的方法包括使用野生型HIV-1，然而，不可能产生足量的病毒用于制备杀死的完整病毒，因为HIV-1感染的T细胞系的产量很低(Coffin等人，Retroviruses,CSH Press,1989)。假设可以提高产量，则还要考虑培养大量传染性HIV-1潜在的可能性。

关于HIV疫苗，已知缺失HIV的nef基因可以减弱病毒。Desrosiers及其同事已经证明，给恒河猴接种缺失nef的SIV可保护其免受野生型SIV攻击(M.D.Daniels等人，Science,1992,258,1938；R.C.Desrosiers等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,1989,86,6353)，而且其它人已经证明nef基因不是SIV和HIV复制必需的(M.D.Daniels等人，Science,1992,258,1938；J.S.Gibbs等人，AIDS Res.and Human Retroviruses,1994,10,343；T.Igarashi等人，J.Gen.Virol.,1997,78,985；H.W.Kestler Ⅲ等人，Cell,1991,65,651)。此外，缺失nef基因导致病毒在正常易感宿主中不致病(M.D.Daniels等人，Science,1992,258,1938)。但是该缺失不提供可以大量生产的病毒形式，而且该形式的病毒并未显示对疫苗生产是安全的。

因此，需要无毒、能够大量生产、而且没有使用野生型HIV-1时存在的考虑和问题的疫苗。

                    发明概述