[发明专利]治疗脓毒症的方法

说明书

本申请要求于1998年10月22日提交的，临时申请序列号为No.60/105,239的申请的优先权。

本发明涉及医疗科学，尤其是利用蛋白C和杀菌通透性增加(BPI)蛋白所进行的脓毒症的治疗。

蛋白C是一种丝氨酸蛋白酶和天然存在抗凝剂，其通过在凝聚级联中灭活因子Ⅴa和Ⅷa，从而在止血中发挥其作用。人蛋白C以2-链酶原的形式在体内循环，但经凝血酶和细胞表面膜蛋白-凝血调控蛋白的限制性蛋白水解后，其将转变为活化的蛋白C(aPC)，该蛋白会在内皮和血小板表面起作用。

连同其他蛋白，aPC可能是以血液凝聚的最重要的负调节物起作用，故可防止血栓的生成。除了抗凝聚功能外，通过抑制细胞因子(如TNF和IL-1)的产生，aPC具有抗炎症效果，并且aPC还有血纤维蛋白溶酶原的性质，故可促进血凝块的裂解。因而，蛋白C酶系统代表了主要的抗凝聚，抗炎症和血纤维蛋白溶解的生理学机制。

杀菌通透性增加蛋白(BPI)是从哺乳动物多形核嗜中性细胞(PMNs)颗粒中分离得到的一种蛋白。通过酸提取和层析的方法(Elsbach,1979,J.Bio.Chem.254:11000；Weiss et al.1987,Blood69:652)，人们已从PMNs中分离得到人BPI，该蛋白具有有效的针对广谱革兰氏阴性菌的杀菌活力。除了具有针对革兰氏阴性菌的杀菌作用外，BPI还能结合并中和脂多糖(LPS)。由于其刺激的炎症应答，LPS还被认为是一种内毒素。

脓毒症，包括严重性脓毒症和脓毒性休克，是对感染或外伤的系统性炎症应答，该应答涉及并由众多宿主防御机制的激活所介导，上述宿主防御机制包括细胞因子网，白细胞和补体，和凝聚/血纤维蛋白溶解系统。[Mesters，等Blood 88:881-886,1996]。散布的血管内凝聚[DIC]具有多器官的微血管内纤维蛋白的广泛沉积的特征，其是脓毒症和脓毒性休克的早期表现。DIC在多器官衰竭综合症的发生过程中是一种重要的介质，并使脓毒性休克病人预后不良。[Fourrier,等Chest 101:816-823,1992]。

脓毒症可由细菌(革兰氏阴性菌或革兰氏阳性菌)，真菌，病毒和其他的感染，以及非传染性刺激物如复合外伤，严重烧伤和器官移植等引发。

虽然任何细菌感染均能导致脓毒症，但其往往是与革兰氏阴性菌感染有关。脓毒症通常是从震颤、发烧、血压下降，吸收和心跳加速，和皮肤损伤开始。在数小时或数天内，脓毒症将发展成血管内自发性凝块，严重性低血压，多器官衰竭和死亡。

多数损害源于内毒素而不是侵染的细菌。内毒素结合到细胞上如单核白细胞/巨嗜细胞或内皮细胞并诱导他们产生多种类型的介质如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和多种白细胞介素(IL-1,IL-6和IL-8)，这一过程表明了其作用。过量TNF-α,IL-1,IL-6和IL-8能诱发脓毒性休克。

近来，有许多为治疗人类脓毒症而进行的尝试，其中的绝大部分是使用阻断与上述疾病病理生理学有关的炎症介质的试剂。然而，利用阻断炎症介质的试剂所进行的临床研究还未成功[综述见Natanson等Ann.Intern.Med 120:771-783,1994；Gibaldi,Pharmacotherapy13:302-308,1993]。由于参与炎症的许多介质是补偿应答的，因而具有有益的作用，故一些研究者认为阻断他们的作用可能是不合适的[如Parrillo,N.Engl.J.Med.328:1471-1477,1993]。

目前，已经有数个利用蛋白C在脓毒症的不同动物模型中所进行的令人鼓舞研究的相关报道。Taylor等[J.Clin.Invest.79:918-25,1987]利用活化的，来源于血浆的人蛋白C进行了狒狒脓毒症模型的研究。上述动物进行了预防性注射(如，在LD₁₀₀E.coli两小时注入之前，给上述动物施用aPC)。全部的5个受试动物均存活了7天，因而，认为它们是实验方案的永久存活者。接受同样E.coli注入的5个对照动物在24-32小时内全部死亡。此外，源于血浆的人蛋白C酶原作为挑战传统疗法的成功的附属物，可用于治疗患有细菌性脓毒症引发的急性紫癜的病人(Gerson等Pediatrics 91:418-422,1993；Smith等Thromb.Haemost,PS1709,p419,1997；Rintala等Lancet 347:1767,1996；Rivard等J.Pediatr.126:646-652,1995)。