[发明专利]生产无基质血红蛋白的方法

权利要求书

1.一种在包括离心机的自动化血液分离器中从含有红血细胞的溶液生产血红蛋白溶液的方法，其特征在于，该方法包括步骤：

(a)分离溶液中的红血细胞；

(b)取出分离步骤中产生的上清液；用洗涤溶液洗涤红血细胞；

(c)裂解红血细胞，产生溶血产物；和

(d)从溶血产物中分离红血细胞的基质。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述洗涤溶液是生理盐水溶液。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述洗涤溶液是杀菌剂。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述洗涤溶液是病毒灭活剂。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(a)到(d)在放置于离心机中的一处理容器内进行。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，该方法还包括步骤：测量溶血产物的离子浓度，并重复步骤(c)到(d)，直到离子浓度下降到预定水平。

7.一种在细胞处理仪器中进行的方法，用于从含有红血细胞和血浆的溶液中产生血红蛋白，其特征在于，该方法包括步骤：

在含有处理袋和管式导线系列的无菌处理装置中收集所述溶液，将该处理袋置于所述细胞处理仪器中的离心机中；

通过在离心机中旋转所述处理袋，从血浆中分离红血细胞；

从所述处理袋中挤出血浆；

将洗涤溶液引入处理袋，以洗涤红血细胞；

洗涤后，挤出上清液；

将蒸馏水引入处理袋以裂解红血细胞，以将血红蛋白释放入溶液；

通过旋转在所述离心机中的所述处理袋，从所述血红蛋白溶液中分离红血细胞膜；和

通过所述处理袋的无菌口取出所述血红蛋白溶液。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，从血红蛋白分离红血细胞膜的步骤包括步骤：

当蒸馏水首次和所述红血细胞接触时，取出首次产生的血红蛋白；和

连续取出随着溶液离子强度下降，额外产生的血红蛋白。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，还包括步骤：

测量由从溶液取出血红蛋白的步骤产生的血红蛋白溶液的离子强度；

加入额外的蒸馏水；和

重复取出额外的血红蛋白，并加入额外的蒸馏水的步骤，直到离子强度达到预定阈值。

10.一种从细胞处理仪器中处理容器内的压积红血细胞分离血红蛋白的方法，该方法包括在仪器内进行的步骤：

在所述处理容器中用盐水溶液洗涤所述红血细胞；

在所述处理容器中裂解所述红血细胞；

在所述处理容器中从血红蛋白分离红血细胞膜和未裂解的红血细胞；和

从所述处理容器抽提溶液中的所述血红蛋白。

11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述分离步骤包括离心所述仪器内的所述处理容器，来压积红血细胞膜和未裂解的红血细胞。

12.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述洗涤步骤包括在盐水溶液中加入去垢剂、抗菌剂或抗病毒剂。

13.如权利要求10所述的方法，其特征在于，该方法进一步包括测量所述血红蛋白溶液的离子强度的步骤，其中重复进行裂解、分离和抽提的步骤，直到离子强度降到预定水平。

14.一种制备修饰的血红蛋白溶液的方法，其特征在于，该方法包括：

将压积红血细胞混入生理盐水溶液；

用盐水溶液洗涤所述红血细胞；

裂解所述红血细胞；

透析过滤所述红血细胞，以除去基质；

透析过滤所述已过滤的红血细胞；

将得到的血红蛋白溶液收集在容器中，所述容器中含有预定的试剂，所述试剂适用于化学修饰所述血红蛋白溶液；

使所述血红蛋白溶液和所述试剂反应；和

将所述反应的溶液储藏在储藏容器中。

15.如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述预定的试剂含有缓冲盐。

16.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述缓冲盐是亚氨基硫醇和活性聚乙二醇。