[发明专利]用于制备1－(4－氟苯基)－3(R)－[3(S)－羟基－3－(4－氟苯基)丙基]－4(S)－(4－羟苯基)－2－β丙内酰胺的立体选择性微生物还原反应

说明书

发明背景

1-(4-氟苯基)-3(R)-[3(S)-羟基-3-(4-氟苯基)丙基]-4(S)-(4-羟苯基)2-β丙内酰胺于1995年3月30日公开的WO95/08532中被公开作为降胆固醇剂。美国专利US5618707公开了一种在利用微生物拜列氏接合糖酵母或八孢裂殖糖酵母将β丙内酰胺制备成相应羟基中间体的过程中使用的酮基中间体(4-(4-氟-苯甲酰基)丁酸或其苯基噁唑烷酮(phenyloxazolidinone)缀合物)的立体选择性微生物还原反应。

发明概述

本发明涉及一种微生物还原羰基的方法，该方法包括利用向其中加入了酮化合物的培养基、培养基和缓冲液、培养基和溶剂、或培养基和缓冲液与溶剂的混合物中的微生物(从环境资源部门(environmental sources)和培养物保藏中心，例如美国典型培养物保藏中心(ATCC)获得)，以便形成、积累和分离一种含有所需立体化学特性的羟基化合物。

尤其是，本发明涉及一种将1-(4-氟苯基)-3(R)-[3-氧代-3-(4-氟苯基)丙基]-4(S)-(4-羟苯基)-2-β丙内酰胺立体选择性还原成1-(4-氟苯基)-3(R)-[3(S)-羟基3-(4-氟苯基)丙基]-4(S)-(4-羟苯基)2-β丙内酰胺的方法，该方法包括将1-(4-氟苯基)-3(R)-[3-氧代-3-(4-氟苯基)丙基]-4(S)-(4-羟苯基)-2-β丙内酰胺加到含有微生物的培养基、培养基和缓冲液、培养基和溶剂、或培养基和缓冲液与溶剂的混合物中，培养所得到的混合物，并分离1-(4-氟苯基)-3(R)-[3(S)-羟基3-(4-氟苯基)丙基]-4(S)-(4-羟苯基)-2-β丙内酰胺。

发现选自下列属中的微生物在本发明的还原反应中是有用的：曲霉属(Aspergillus)、弯孢属(Curvularia)、束孢霉属(Doratomyces)、地霉属(Geotrichum)、被孢霉属(Mortierella)、毛霉属(Mucor)、糖酵母属(Saccharomyces)、Scytalidium、毕赤氏酵母属(Pichia)、有孢圆酵母属(Torulaspora)、链孢霉属(Neurospora)和红球菌属(Rhodococcus)。上述属中的下列菌种是优选的：雪白曲霉(Aspergillusniveus)、新月弯孢(Curvularia lunata)、发网菌状孢霉(Doratomyces stemonitis)、白地霉(Geotrichum candidum)、深黄被孢霉(Mortierella isabellina)、总状毛霉和卷枝毛霉(Mucor racemosus and circinelloides)、啤酒糖酵母和葡萄汁糖酵母(Saccharomyces cerevisiae and uvarum)、Scytalidium lignicola、Pichiamethanolitica、发酵有孢圆酵母(Torulaspora fermentati)和发酵有孢圆酵母属各种，粗糙链孢霉(Neurospora crassa)和红串红球菌、藤黄红球菌、紫红红球菌(Rhodococcus erythropolis，fascians，rhodoehrous)和红球菌属各种。

尤其是，本发明涉及一种微生物还原1-(4-氟苯基)-3(R)-[3-氧代-3-(4-氟苯基)丙基]-4(S)-(4-羟苯基)-2-β丙内酰胺(以下通式II)的羰基的方法，该方法包括将所述化合物加到含有微生物的培养基、培养基和缓冲液、培养基和溶剂、或培养基和缓冲液与溶剂的混合物中，尤其是其中所述微生物是藤黄红球菌ATCC No.202210或真菌分离物白地霉ATCC No.74487，培养所得到的混合物，并分离1-(4-氟苯基)-3(R)-[3(S)-羟基-3-(4-氟苯基)丙基]-4(S)-(4-羟苯基)-2-β丙内酰胺(以下通式I)。