[发明专利]人胸腺素α原基因突变体合成、表达及应用无效
| 申请号： | 00107954.9 | 申请日： | 2000-06-01 |
| 公开（公告）号： | CN1326947A | 公开（公告）日： | 2001-12-19 |
| 发明（设计）人： | 徐明波;王勇波;黄向东;赵冰;卢安京 | 申请（专利权）人： | 北京双鹭药业有限责任公司 |
| 主分类号： | C07K14/435 | 分类号： | C07K14/435;C12N15/63;C12N15/64;A61K38/17;A61P1/16;A61P35/00;A61P37/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100041 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种重组人胸腺素α原(ProTα)的制备方法。本发明利用遗传密码的兼并性,设计了大肠杆菌偏爱的密码子,降低了DNA序列中的GC含量,合成了ProTα的DNA序列。将PCR扩增的人ProTα基因与原核表达载体如pBV220组装成高效表达质粒,转化大肠杆菌后用温度诱导ProTα基因表达,表达量达到菌体总蛋白的20－25%。工程菌经发酵扩增,破碎后保留上清。上清经热处理后,进行阴离子交换层析和凝胶排阻层析二步法纯化产品。纯品加保护剂后制成药用冻干制剂。该制剂可用于人类免疫缺陷性疾病、病毒性肝炎和癌症的治疗。 | ||
| 搜索关键词： | 胸腺 基因 突变体 合成 表达 应用 | ||
【主权项】：
1、一种制备人胸腺素α原的方法，包括：(1)合成富含A、T的全基因；(2)将(1)得到的基因克隆到表达载体中；(3)用所述的表达载体转化原核细胞得到工程菌；(4)通过发酵技术扩增工程菌，得到人胸腺素α原的高水平表达。
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