[发明专利]水蛭素基因hv2-47k及其合成与表达无效
申请号: | 00129747.3 | 申请日: | 2000-10-10 |
公开(公告)号: | CN1348003A | 公开(公告)日: | 2002-05-08 |
发明(设计)人: | 黄秀东;游自立;吕志强;肖建国;于廷和;王立兵 | 申请(专利权)人: | 梅伯皋 |
主分类号: | C12N15/15 | 分类号: | C12N15/15;C12N15/63;C12N15/81;A61K38/58 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 400060 *** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | 本发明是以天然水蛭素的二十多种变异体的氨基酸序列资料为依据,以HV2型水蛭素为原型,将其第47位天冬酰胺(N)替换为赖氨酸(K),选用甲醇酵母Pichiapastoris所喜好的遗传密码子,合成八段脱氧核苷酸片段(引物),采用递归式PCR(RecursivePCR)法进行拼接,最终得到可插入pPIC9质粒载体的新型水蛭素基因hv2-47k。hv2-47k基因在甲醇酵母Pichiapastoris中以分泌型表达,上罐发酵时,发酵液上清中新型水蛭素表达量不低于30,000ATU/ml(诱导50小时),相当于2.0g/L的产量,此为可检索文献中水蛭素表达量之首。 | ||
搜索关键词: | 水蛭 基因 hv2 47 及其 合成 表达 | ||
【主权项】:
1.基因工程药物新型水蛭素HV2-47K,其特征为,该药物是选用甲醇酵母Pichiapastoris所喜好的遗传密码,人工合成的基因hv2-47k在Pichia酵母中表达而得;
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