[发明专利]衍生自牛脑的膜结合鞘磷脂酶,其分离方法和抗鞘磷脂酶单克隆抗体无效
| 申请号： | 01104755.0 | 申请日： | 2001-02-22 |
| 公开（公告）号： | CN1370832A | 公开（公告）日： | 2002-09-25 |
| 发明（设计）人： | 金大敬;郑盛允;郑光默 | 申请（专利权）人： | SK株式会社;金大敬 |
| 主分类号： | C12N9/20 | 分类号： | C12N9/20;C07K1/14;C07K1/18;C07K16/00 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所 | 代理人： | 徐迅 |
| 地址： | 韩国*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 公开了一种衍生自牛脑神经元膜的鞘磷脂酶,其分子量为60kDa,活性是Mg2+依赖性的,最适pH范围是6.0－9.0。其制备通过牛脑组织匀浆,离心匀浆,除去细胞碎片和核;从上清液中将细胞膜作为沉淀通过离心分离出来;用含有硫酸铵的缓冲液处理该细胞膜沉淀,使鞘磷脂酶从膜上解离出来;对抽提液进行阴离子交换层析;层析组分在含有TritonX－100的缓冲液中超声,并对超声组分进行离心,获得含有鞘磷脂酶的上清液;以预定顺序对上清液进行疏水作用层析,阴离子交换高效液相层析,疏水作用高效液相层析和阳离子交换快速蛋白质液相层析,纯化了鞘磷脂酶。还公开了针对鞘磷脂酶,由杂交瘤SM1A5(保藏号KCLRF－BT－00025)产生的单克隆抗体。 | ||
| 搜索关键词： | 衍生 结合 磷脂酶 分离 方法 单克隆抗体 | ||
【主权项】：
1.一种衍生自牛脑神经元膜的鞘磷脂酶，其特征在于，该鞘磷脂酶分子量为60kDa，活性是Mg2+的，最适pH范围是6.0-9.0。
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