[发明专利]一种用于来自叶外植体的茶树植物的微体繁殖的方法

摘要

本发明涉及用于来自外植体的茶树植物的微体繁殖的新方法,其是通过在不同的培养基中培养该外植体,所述外值体由完全合拢的、半开放的或全张开的经过愈伤组织相而获得的。

主权项

1.一种用于茶树植物的微体繁殖的方法，所述的方法包括下列步骤：(a)切除来自体外培养的茶树植物的完全合拢的、半开放的或全张开的叶的外植体；(b)在温度为20℃-40℃、在至少52μg/molm-2s-1的白色冷光存在且光照16小时光周期下，在第一培养基中培养用于愈伤组织诱导的外植体6-10周，所述的培养基为补充有维生素、1-3mg/l甘氨酸、2.5-10.0mg/l2，4-二氯苯氧乙酸的0.8％琼脂固化的基本Murashige和Skoog培养基；(c)将所述愈伤组织转移至用于生根的第二培养基中至少6-10周，所述的培养基为补充有细胞激动素如0.5-8mg/l6-苄基氨基嘌呤和茁长素如0.1-0.8mg/l吲哚-3-丁酸或吲哚-3-乙酸的0.8％琼脂固化的基本MS培养基；(d)将所述生根愈伤组织转移至用于引发幼芽的第三培养基中4-10周，所述的培养基为茁长素游离培养基且含0.5-8mg/l6-苄基氨基嘌呤；(e)将所述幼芽转移至第四繁殖培养基中培养4-6周，得到生根的幼芽，所述的培养基为补充有5μM苯基噻二唑基脲的液体琼脂化基本MS培养基；(f)切断长幼芽得到3cm长的末端，用吲哚-3-丁酸对其进行20-30分钟的处理，并在含1∶1比例的沙和土的混合物的广口瓶中培养幼芽60-75天；和(g)在田地中使生根的幼芽生长以得到有活力且健壮的茶树植物。