[发明专利]人源性肝细胞生长刺激因子cDNA克隆和序列无效
申请号: | 01114478.5 | 申请日: | 2001-05-23 |
公开(公告)号: | CN1386857A | 公开(公告)日: | 2002-12-25 |
发明(设计)人: | 苏先狮;唐世刚 | 申请(专利权)人: | 苏先狮 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/12;C12P19/34;C07H21/00;C12Q1/68 |
代理公司: | 湖南兆弘专利事务所 | 代理人: | 赵洪,杨慧 |
地址: | 410011 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明公开了利用简并PCR技术从人胎肝cDNA文库扩增出目的片断,并以此为探针进行核苷酸杂交筛选人胎肝cDNA文库,成功获得目的基因HDSSF克隆,其cDNA链为792bp,含有594bp的完整开放续码框架和5’及3’末端非编码区序列。本发展为下一步开展人源性HDSSF的重组产品研制和生产该基因产品奠定了基础。 | ||
搜索关键词: | 人源性 肝细胞 生长 刺激 因子 cdna 克隆 序列 | ||
【主权项】:
1、一种人源性肝细胞生长刺激因子cDNA克隆和序列,其特征在于采用从乳猪肝组织中纯化的肝脏刺激物质HDSSF测定的部分氨基酸序列,合成简并引物,依据同源克隆的原则,利用简并PCR技术从人胎肝cDNA文库扩增出目的片断,并以此为探针进行核酸杂交筛选人胎肝cDNA文库,从而获得目的基因HDSSF克隆,其cDNA链为792bp,含有594bp的完整开放续码框架和5’及3’末端非编码序列,该序列显示HDSSF为一个含有198个氨基酸残基的促肝细胞生长因子,HDSSF核苷酸序列在ABIPRISMTM377XLDNA测序仪上以末端终止法进行HDSSF核苷酸序列测定,该序列为:AAAAGCTGTAGTGGGTTTGTAGCCAGGATGACAGCGGTACCTTAACACAGTCCCAACAACATACACATCCTCTTTTGTCGGCCTAGGATATGTTTCCCAGGAAGCATGTGGAATGTCTGGTAAATTAATACAACTATTGGGCTCACAAGCAGGAGGAGAAGGATTCCATTTGCTATCAGCATCACAATGAATTACACTGCTGCCTCTGAGAACAAAACCTTTTTGGCACTTAAACACAATAGTGTCTTTGTAATTATAGATGGGTCCAAATCCAGAGACCATTTCCCCATGTGAAACATCTGGCTTGCGACAGGTGATTTTTTCACAGGTAGGAGGGCTTGGTCTCCAAACGCCTATTGTTTCATTCTCCACAGTGCAAGAAATGGAGGCATGGCCCAAGAGTGAGAAGCGGGGGTCACAGCTGTAGGTGACAGAAAAGCCGTATGCGTAGAAATTTTCTTCACCGCTGTGCCTTCCATTCCTGATGTCTGGAGGAGGCTTACACTTGACAATTTCACATTGTGGGAGAGGATGACTCCAGCCAACTCCTCTATCTTGGACTTCACAACGACTAGTGGTTGAGCCAATTAAGAAAAA
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