[发明专利]一种新型纤溶酶原激活剂(TPA)突变体的结构与用途无效
| 申请号： | 02100558.3 | 申请日： | 2002-02-05 |
| 公开（公告）号： | CN1381460A | 公开（公告）日： | 2002-11-27 |
| 发明（设计）人： | 朱美财;李文;占志;王荫静;刘成刚 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军空军总医院 |
| 主分类号： | C07H21/00 | 分类号： | C07H21/00;C07K14/00;C12N15/64;A61K38/16;A61P9/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 10003*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明是根据TPA的结构特点,在将TPA分子中指状区和Kringle1区去掉的基础上,将TPA分子中PAI－1结合位点氨基酸进行突变,构建具有TPA活性且其活性不被PAI－1抑制的新一代TPA突变体。主要内容是扩增出天然TPA氨基酸1－3和176－527的DNA序列。将TPADNA中PAI－1结合位点,核苷酸序列373－384的AAGCACAGGAGG改变为GCGGCCGCGGCG,使相应的氨基酸KHRR突变为AAAA,构建了新的TPA突变体,并克隆于大肠杆菌表达载体。在大肠杆菌中得到高效表达。表达蛋白占总菌体蛋白的30%,以包涵体形式存在。经蛋白质复性,得到了有活性的TPA突变体。将新的TPA突变体,克隆于比赤酵母分泌型表达载体,在培养上清中得到高活性的TPA突变体。在大肠杆菌和比赤酵母表达的新的TPA突变体与PAI－1反应后TPA活性无抑制。说明核苷酸序列373－384和其相对应的氨基酸序列影响PAI－1结合活性,而不影响其纤溶酶原水解活性。故本发明涉及针对一种新型TPA突变体的核苷酸序列和结构及其成为治疗活性好、用量少的治疗心肌梗塞和脑血栓等血栓性疾病的新型生物工程药物。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 新型 纤溶酶原 激活剂 tpa 突变体 结构 用途 | ||
【主权项】：
1.TPA突变体的核苷酸序列(5’-3’)：1atgtcttaccaaggaaacagtgactgctactttgggaatgggtcagcctaccgtggcacg6061cacagcctcaccgagtcgggtgcctcctgcctcccgtggaattccatgatcctgataggc120121aaggtttacacagcacagaaccccagtgcccaggcactgggcctgggcaaacataattac180181tgccggaatcctgatggggatgccaagccctggtgccacgtgctgaagaaccgcaggctg240241acgtgggagtactgtgatgtgccctcctgctccacctgcggcctgagacagtacagccag300301cctcagtttcgcatcaaaggagggctcttcgccgacatcgcctcccacccctggcaggct360361gccatctttgccgcggccgcggcgtcgcccggagagcggttcctgtgcgggggcatactc420421atcagctcctgctggattctctctgccgcccactgcttccaggagaggtttccgccccac480481cacctgacggtgatcttgggcagaacataccgggtggtccctggcgaggaggagcagaaa540541tttgaagtcgaaaaatacattgtccataaggaattcgatgatgacacttacgacaatgac600601attgcgctgctgcagctgaaatcggattcgtcccgctgtgcccaggagagcagcgtggtc660661cgcactgtgtgccttcccccggcggacctgcagctgccggactggacggagtgtgagctc720721tccggctacggcaagcatgaggccttgtctcctttctattcggagcggctgaaggaggct780781catgtcagactgtacccatccagccgctgcacatcacaacatttacttaacagaacagtc840841accgacaacatgctgtgtgctggagacactcggagcggcgggccccaggcaaacttgcac900901gacgcctgccagggcgattcgggaggccccctggtgtgtctgaacgatggccgcatgact960961ttggtgggcatcatcagctggggcctgggctgtggacagaaggatgtcccgggtgtgtac10201021accaaggttaccaactacctagactggattcgtgacaacatgcgaccg1068
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国人民解放军空军总医院，未经中国人民解放军空军总医院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/02100558.3/，转载请声明来源钻瓜专利网。
