[发明专利]以金磁微粒为载体检测抗双链DNA抗体的方法

摘要

本发明涉及一种以金磁微粒为载体，运用间接ELISA法、免疫荧光法或化学发光法检测抗双链DNA抗体的方法。本方法包括以下步骤：(1)将金磁微粒与双链DNA相混合，在一定条件下双链DNA固定在金磁微粒表面或运用金磁微粒从人全血、唾液、精液或质粒中提取DNA并固定在金磁微粒表面；其中金磁微粒由具有超顺磁性的核心部分和组装层部分构成，核心部分为磁性微粒，组装层部分为纳米级贵金属颗粒；(2)运用间接ELISA法、免疫荧光法或化学发光法检测待测样品中存在的抗双链DNA抗体。本发明检测方法具有高度特异性、灵敏度高、费用低廉、操作简便快速、以及应用范围广等优点。

主权项

1.一种以金磁微粒为载体检测抗双链DNA抗体的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：1]DNA在金磁微粒表面的固定：取金磁微粒加入离心管中，磁性分离弃上清后，用偶联缓冲液洗涤金磁微粒，磁性分离弃上清后加入纯化的天然双链DNA或者质粒DNA及偶联缓冲液于金磁微粒中，在20～40℃条件下充分反应20～40min，形成金磁微粒-DNA复合物；或者将全血、唾液、精液或质粒制成溶液体系，用金磁微粒从中提取DNA并使其固定在金磁微粒表面；2]金磁微粒的封闭：将金磁微粒磁性分离弃上清后，加入封闭剂于离心管中，在20～40℃条件下充分反应1～2h，取出，4℃过夜；3]金磁微粒的清洗：用清洗缓冲液清洗封闭后的金磁微粒；4]金磁微粒的保存：将清洗完毕的金磁微粒加入保存缓冲液，4℃保存，备用；5]抗双链DNA抗体的检测：以清洗后的金磁微粒表面的DNA为抗原，运用间接ELISA法、免疫荧光法或化学发光法检测抗双链DNA抗体。