[发明专利]重组人粒细胞集落刺激因子的生产方法无效
申请号: | 200610116765.7 | 申请日: | 2006-09-29 |
公开(公告)号: | CN101153278A | 公开(公告)日: | 2008-04-02 |
发明(设计)人: | 黄阳滨;孙九如;张翊;任军;张继岗;梁光军 | 申请(专利权)人: | 上海新生源医药研究有限公司 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12N15/27;C07K14/53;C12N1/21 |
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地址: | 201203上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供了一种重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)的编码序列、生产该重组人粒细胞集落刺激因子的方法,以及用于该方法的表达载体和宿主细胞。采用了pET30a(+)表达rhG-CSF,获得了高水平的表达菌株;通过控制发酵条件,达到了较高蛋白表达率;进一步表达形式分析发现其为包涵体表达。在此基础上对分泌表达的重组人粒细胞集落刺激因子的纯化进行了大量的摸索和研究后,得到了一套重组人粒细胞集落刺激因子纯化方法。用本法,可得到高得率、高纯度的重组人粒细胞集落刺激因子蛋白,并能满足临床需要。本发明可高效、简便、低成本地获得重组人粒细胞集落刺激因子纯品。 | ||
搜索关键词: | 重组 粒细胞 集落刺激因子 生产 方法 | ||
【主权项】:
1.一种重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)的生产方法,其特征在于,它包含以下步骤:a.获得优化的重组人巨噬细胞集落刺激因子的DNA序列;b.构建合适表达载体;c.转化宿主细胞,筛选获得高表达的工程细胞。
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