[发明专利]一种窄分布的低平均分子量聚合血红蛋白的制备方法无效
| 申请号： | 200610130360.9 | 申请日： | 2006-12-15 |
| 公开（公告）号： | CN101200499A | 公开（公告）日： | 2008-06-18 |
| 发明（设计）人： | 王翔;杨成民;黄磊;李燊;张鸿辉;梁伟光;李洪英;许丽丽 | 申请（专利权）人： | 天津协和生物科技发展有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/805 | 分类号： | C07K14/805;C07K1/14;C07K1/10 |
| 代理公司： | 国嘉律师事务所 | 代理人： | 王里歌 |
| 地址： | 300457天津市天津经济技*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 一种窄分布的低平均分子量聚合血红蛋白的制备方法，其特征在于它的包括以下步骤：①将血红蛋白用泵加入凝胶阻滞色谱中平衡，然后分布加入双功能交联剂进行聚合反应；②用缓冲溶液将步骤①生成的聚合产物洗脱、收集；收集液用氨基酸中止反应；最后超滤浓缩；③采用硼氢化钠对得到的聚合血红蛋白进行还原处理后，再用超滤、层析方法对该产物进行分离纯化。其优越性在于：1.本发明所制备的聚合血红蛋白为窄分布低分子量聚合血红蛋白，平均分子量小于200kD；2.克服了传统的戊二醛制备方法中聚合产物均一性差的缺陷；3.该聚合血红蛋白很容易与未聚合的单体血红蛋白分离，由于减少了蛋白胶体的数量而使胶体渗透压降低，粘度却无显著变化。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 分布 平均 分子量 聚合 血红蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种窄分布的低平均分子量聚合血红蛋白的制备方法，其特征在于它的包括以下步骤：①将血红蛋白用泵加入凝胶阻滞色谱中平衡，然后分布加入双功能交联剂进行聚合反应，反应温度为0～30℃，pH值为5.0～7.0，反应时间为3～10小时；经过修饰的血红蛋白溶液浓度为1～100mg/ml，血红蛋白与双功能交联剂的摩尔比为1∶10～1∶50；②用缓冲溶液将步骤①生成的聚合产物洗脱、收集；收集液用氨基酸中止反应，双功能交联剂与氨基酸的摩尔比为2～3∶1；最后超滤浓缩；③采用硼氢化钠对得到的聚合血红蛋白进行还原处理后，再用超滤、层析方法对该产物进行分离纯化，得到窄分布，且平均分子量在250kD以下的聚合血红蛋白。
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