[发明专利]一种从中性嗜盐菌Halomonas salina检测和提取相容性溶质ectoine的新方法无效
| 申请号： | 200610135272.8 | 申请日： | 2006-12-02 |
| 公开（公告）号： | CN101191769A | 公开（公告）日： | 2008-06-04 |
| 发明（设计）人： | 陈荣忠;姜蔚宇 | 申请（专利权）人： | 国家海洋局第三海洋研究所 |
| 主分类号： | G01N21/25 | 分类号： | G01N21/25;G01N27/447;C12Q1/24 |
| 代理公司： | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 | 代理人： | 张松亭 |
| 地址： | 362300*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种从中性嗜盐菌Halomonas salina检测和提取相容性溶质ectoine的新方法：将经过渗透压震荡的菌体，离心收集并冻干，经甲醇∶氯仿∶水(10∶5∶4)对冻干细胞进行抽提，剧烈震荡，离心促进分相，再加入氯仿和水，剧烈震荡，再次离心分相；回收含有相容性溶质的水相，冻干后溶于乙醇中；采用洗脱液的pH为7.0的Tris－HCl缓冲液，将ectoines从弱碱性阴离子二乙基氨乙基纤维素和弱酸性阳离子羧甲基纤维素串连柱上被洗脱下来，从而与混合物中的其他在生理条件下呈阳离子和阴离子的杂质分离，210nm紫外下检测，收集生理条件下的ectoines与其他有吸收峰的中性物质。相容性溶质Ectoine的进一步鉴定，其采用MECC胶束毛细管电泳法。本文中所采用的阴离子阳离子交换柱连用并以210nm紫外吸收峰作为检测信号的纯化方法不但比两次过柱节省了大量的时间，而且也提高了分离的效率，过柱一次就可以将各种阳离子、阴离子以及210nm下无吸收峰的中性化合物除去。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 中性 嗜盐菌 halomonas salina 检测 提取 相容性 溶质 ectoine | ||
【主权项】：
1.一种从中性嗜盐菌Halomonas salina检测和提取相容性溶质ectoine的方法：将经过渗透压震荡的菌体，离心收集并冻干，经甲醇∶氯仿∶水(10∶5∶4)对冻干细胞进行抽提，剧烈震荡，离心促进分相，再加入氯仿和水，剧烈震荡，再次离心分相；回收含有相容性溶质的水相，冻干后溶于乙醇中；其特征在于采用洗脱液的pH为7.0的Tris-HCl缓冲液，将ectoines从弱碱性阴离子二乙基氨乙基纤维素和弱酸性阳离子羧甲基纤维素串连柱上被洗脱下来，从而与混合物中的其他在生理条件下呈阳离子和阴离子的杂质分离，210nm紫外下检测，收集生理条件下的ectoines与其他有吸收峰的中性物质。
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