[发明专利]从原核生物中纯化人乳头瘤病毒晚期蛋白L1的方法

摘要

本发明提供了一种从大肠杆菌中纯化人乳头瘤病毒晚期蛋白L1的方法。该方法通过对大肠杆菌菌体裂解上清中的L1蛋白进行无盐沉淀、复溶、离子交换层析、疏水层析和复性可以大规模制备电泳纯度达到98％以上的类病毒颗粒。该类病毒颗粒具有良好的免疫原性，能诱导针对同型HPV病毒的中和抗体，可作为预防HPV感染的疫苗。

主权项

1.一种纯化乳头瘤病毒(特别是人类乳头瘤病毒)L1蛋白质的方法，该方法包括如下步骤：(a)获得表达有所述乳头瘤病毒L1蛋白质的原核宿主细胞，例如大肠杆菌细胞；这可以通过例如将表达有所述乳头瘤病毒L1蛋白质的原核宿主细胞培养物离心、收集细胞而实现；(b)将所述原核宿主细胞在重悬溶液中重悬，所述重悬溶液含有足以溶解所述乳头瘤病毒L1蛋白质的浓度的盐，优选还含有缓冲液，例如Tris缓冲液(例如20mM Tris缓冲液pH7.2)；(c)破碎所述原核宿主细胞；优选通过匀浆器破碎、均质机破碎、超声波处理、研磨、高压挤压、溶菌酶处理中的一项或者多项方法来实现；(d)除去不溶性部分，获得菌体裂解上清；优选通过如下方式实施：离心(例如以足以沉降细菌细胞碎片的离心力进行离心)裂解物，留取上清液；(e)将菌体裂解上清中盐的浓度降低到所述乳头瘤病毒L1蛋白质足以被选择性沉淀的盐浓度；和(f)非必需地收获沉淀，例如通过离心来实现。