[发明专利]核酸三联探针和核酸四联探针

摘要

核酸三联探针和核酸四联探针，由三个或四个核酸串联探针构成，每个核酸串联探针均有三个核酸片段的正链或负链，其中至少含有一个核酸片段能够与靶序列互补配对，在进一步的杂交过程中，三个或四个核酸串联探针，通过相邻核酸串联探针间的互补核酸片段碱基配对，产生带有三个核酸单链分支的Y型核酸三联探针或四个核酸单链分支的十字型核酸四联探针，在应用时，由配对使用的两种核酸三联探针间或同种核酸四联探针间的互补单链分支碱基配对，并最终形成网络状的核酸探针聚合体。应用磁珠连接捕获探针与靶序列和核酸三联探针或核酸四联探针间的杂交技术，可方便地检测到10个左右拷贝的靶序列。

主权项

1.构成核酸三联探针或核酸四联探针的核酸串联探针，具有如下的共同特征；A.每个核酸串联探针均由三个核酸片段的正链或负链构成，由字母A，B，C分别代表不同的核酸片段正链，A’，B’ 和C’分别代表核酸片段的负链，正链5’-A-B-C-3’与负链3’-A’-B’-C’-5’完全反方向平行碱基互补配对，形成双链DNA或RNA，这是公知的分子生物学知识；B.权利1.A所述的核酸片段，是指含有正链和负链并反方向平行碱基互补配对的双链核酸序列，核酸片段正链和负链是靶序列中的部分序列，也可由人工序列替代；C.如权利1.B所述，构成核酸串联探针的核酸序列，可以是靶序列中的核酸片段正链或负链，也可以是人工设计的核酸序列，但在核酸三联探针和核酸四联探针中必须含有一个以上靶序列核酸片段正链和负链；D.构成核酸串联探针三个核酸片段的正链或负链，其碱基互补配对的靶序列核酸片段正链或负链位置各不相同，在不同的核酸串联探针中，分别含有同一种核酸片段的正链和负链；E.核酸三联探针或核酸四联探针由三个或四个核酸串联探针构成，可以形成5’单链分支和3’单链分支两种类型；F.核酸三联探针或核酸四联探针中的两个不同的核酸串联探针含有的核酸片段正链或负链，其碱基互补配对的靶序列也可以是连锁的；G.核酸三联探针或核酸四联探针中的不同核酸串联探针，由完全不同的核酸片段正链或负链构成，相邻的核酸串联探针间具有互补的核酸片段正链或负链，三个或四个核酸串联探针通过互补的核酸片段正链或负链的碱基配对，形成核酸三联探针或核酸四联探针；H.如权力1.A，1.B，1.C，1.D，1.E，1.F和1.G所述，在核酸三联探针或核酸四联探针中，构成核酸串联探针的所有核酸片段正链或负链，分别位于不同核酸串联探针的端部和中部；I.如权力1.A，1.B，1.C，1.D，1.E，1.F，1.G和1.H所述，核酸串联探针可以完全由核酸片段正链同方向连接形成，也可以完全由核酸片段负链同方向连接形成和由核酸片段的正链和负链同方向混合连接形成，核酸序列同方向连接是公知的分子生物学知识；J.构成核酸串联探针的核酸片段正链或负链长度在5-500个核苷酸。