[发明专利]一种土壤微生物基因组DNA提取方法无效
| 申请号： | 200710012539.9 | 申请日： | 2007-08-22 |
| 公开（公告）号： | CN101372689A | 公开（公告）日： | 2009-02-25 |
| 发明（设计）人： | 苏振成;张惠文;李新宇;吴敏娜;张成刚 | 申请（专利权）人： | 中国科学院沈阳应用生态研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N15/31 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 | 代理人： | 许宗富;周秀梅 |
| 地址： | 110016辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及分子生物学技术领域，具体的说是一种土壤微生物基因组DNA提取方法。具体将土壤样品与石英沙相混合放入提取缓冲液中，而后将离心管置于核酸提取仪内振荡40－60秒，或在涡旋混合器上振荡10－20分钟；加将50－100μl溶菌酶，30－40℃温浴30－60分钟后，再加入75－125μl SDS混匀，再在50－60℃温浴30－60分钟，离心得上清液；经进一步分离纯化，即得土壤微生物基因组DNA。采用本发明方法提取的土壤基因组DNA纯度高，OD260nm/OD280nm值可达1.6以上，产量可达100ug/ml，全程用时约10小时；整个过程中不需用纯化试剂盒进一步纯化，可以直接应用于PCR扩增，以所得DNA为模板，可以顺利扩增出目的产物。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 土壤 微生物 基因组 dna 提取 方法 | ||
【主权项】：
1.一种土壤微生物基因组DNA提取方法，其特征在于按如下步骤操作：1)初步裂解微生物细胞：取土壤样品与石英沙相混合放入含有850-1000μl提取缓冲液的离心管中，其中土样与石英沙重量比为1:0.5-2；而后将离心管置于核酸提取仪内振荡40-60秒，或在涡旋混合器上振荡10-20分钟；2)进一步裂解微生物细胞：将50-100μl浓度为100mg/ml的溶菌酶加入初步裂解液中混匀，在30-40℃温浴30-60分钟后，再加入75-125μl 20％(w/v)的SDS，混匀，再在60-70℃温浴30-60分钟，10000-12000转/分钟离心10-20分钟，收集上清；3)土壤微生物基因组DNA：将裂解后的缓冲液经分离纯化得粗提DNA溶液，而后将粗提液纯化，即得土壤微生物基因组DNA。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国科学院沈阳应用生态研究所，未经中国科学院沈阳应用生态研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/200710012539.9/，转载请声明来源钻瓜专利网。
