[发明专利]一种检测山羊催乳素基因单核苷酸多态性的PCR－RFLP方法无效
| 申请号： | 200710017973.6 | 申请日： | 2007-06-04 |
| 公开（公告）号： | CN101063169A | 公开（公告）日： | 2007-10-31 |
| 发明（设计）人： | 蓝贤勇;陈宏;潘传英 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司 | 代理人： | 李郑建 |
| 地址： | 712100陕西*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种快速检测山羊催乳素(PRL)基因单核苷酸多态性(SNP)的PCR－RFLP(聚合酶链式反应－限制性片段长度多态性)方法，该方法是以山羊基因组DNA或包含PRL基因的DNA序列为模板，在Taq DNA聚合酶、Buffer(缓冲环境)、Mg++、dNTPs存在的情况下，利用1对PCR(聚合酶链式反应)引物，在PCR条件下进行扩增，然后利用限制性内切酶对其进行酶切，再根据琼脂糖凝胶电泳对其进行片段大小分离，利用凝胶成像系统分析其片段大小，从而确定其单核苷酸多态性。该方法操作简单、快速，成本低，而且检测的精确度高，便于推广应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 山羊 催乳素 基因 核苷酸 多态性 pcr rflp 方法 | ||
【主权项】：
1.一种检测山羊催乳素基因单核苷酸多态性的聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法，其特征在于，以山羊基因组DNA或包含PRL基因的DNA序列为模板，在Taq DNA聚合酶、缓冲环境、Mg++、dNTPs存在的情况下，利用一对聚合酶链式反应引物，在PCR条件下进行扩增，然后利用限制性内切酶对扩增产物进行酶切，再通过电泳检测即可鉴定山羊催乳素基因单核苷酸多态性；所述的聚合酶链式反应引物包括：上游引物：Forward primer：5′-ATTCCTGGAGCCAAAGAG-3′；下游引物：Reverse primer：5′-TGTGGGCTTAGCAGTTGT-3′。
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