[发明专利]对核酸分子多片段基因进行平行检测和实时定量分析的方法

摘要

本发明提供了一种能通过一步反应较高通量地对多个基因片段或是多个核酸区域进行平行检测并实时定量分析的方法，并能准确检测这些基因片段或是核酸区域中单个碱基的变异。本发明的方法操作简便，不需要多种荧光基团标记，不需要多个反应通道，能高通量地对多个基因片段或是多个核酸区域进行定量检测，并能检测多个基因片段或是多个核酸区域中少至单个碱基的变化。

主权项

1. 一种平行测定样品中多个基因片段或是多个核酸区域的存在或量的方法，该方法包括以下步骤：a)提供样品液，所述样品液中包含待检测的基因片段或核酸区域；b)提供固相载体，所述载体表面不同的位置固定了多种核酸探针分子；c)提供至少一对一级引物，所述一级引物对中的至少一个引物包含与所述待测核酸分子互补的区域和不互补的区域；d)提供至少一对二级引物，所述二级引物对中的至少一个与所述一级引物对中的所述至少一个引物的不互补区域的序列匹配；e)使所述样品液、固相载体、一级引物、二级引物相互接触；f)对所述样品中的待检测的基因片段或核酸区域进行扩增，在扩增反应时，用荧光基团标记扩增产物；g)使所述扩增产物在扩增反应中和所述核酸探针分子相互杂交；h)激发所述杂交上的扩增产物上的荧光分子，检测此荧光信号的位置和强度，从而确定样品中多种核酸分子的存在或量。