[发明专利]一种防治脱发和促进生发的siRNA及其制备方法和应用无效
| 申请号： | 200710038637.X | 申请日： | 2007-03-29 |
| 公开（公告）号： | CN101054579A | 公开（公告）日： | 2007-10-17 |
| 发明（设计）人： | 王维荣;黄伟达;黄勇前;谢承光 | 申请（专利权）人： | 上海复旦新杨生物科技有限责任公司;上海复远生物化学研究所有限公司;复旦大学 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/70;A61K31/7088;A61P17/14 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 | 代理人： | 陆飞;盛志范 |
| 地址： | 200433上海市杨浦区*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属于生物制剂技术领域，具体涉及一种防治脱发和促进生发的siRNA及其制备方法和应用。内容包括：构建可以在大肠杆菌中高效表达的与防治脱发和促进生发功能相关的长双链RNA(dsRNA)的表达载体pET－SRAR；转化大肠杆菌后发酵生产该长双链RNA，得到dsRNA；发酵的大肠杆菌菌体经均质机均质化破壁抽提大肠杆菌总RNA，抽提物经纯化获得dsRNA；再经水解纯化得到小干扰RNA(siRNAs)；用脂质体包埋siRNAs，复配后得到防治脱发和促进生发的siRNAs制剂。本发明制备的制剂具有明显防治脱发和促进生发的作用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 防治 脱发 促进 生发 sirna 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
1、一种防治脱发和促进生发的siRNA，其特征在于它由下述方法获得：将基因片断SR和AR连接而成的人工基因构建到表达有颈环结构SR-AR双链RNA的表达载体pET-SAAK上；转化大肠杆菌后进行发酵，表达生产dsRNA；离心收集大肠杆菌菌体，以均质机破碎法破菌，得到RNA抽提物，该抽提物用CF-11树脂进行吸附，洗去单链RNA和DNA分子，洗脱收集dsRNA部分，洗脱液通过酒精沉淀回收得到dsRNA；再以RNaseIII将长链的dsRNA切成18-25bp的siRNAs，除去RNase III，获得防治脱发和促进生发的siRNAs；其中，SR为睾丸激素还原酶基因片段，AR为雄激素受体基因片段。
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