[发明专利]扶正化瘀植物药中虫草菌粉原料指纹图谱质量控制方法

摘要

本发明涉及扶正化瘀植物药中虫草菌粉原料指纹图谱质量控制方法，包括步骤：(1)提取虫草菌丝粉：取0.100g虫草菌粉，加入纯净水，超声提取，过滤进样；(2)梯度洗脱流动相：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，水和乙腈为流动相梯度洗脱：0－30min，0－7％B；(3)标准指纹图谱的建立：确立虫草菌粉HPLC标准指纹图谱，选取3个特征峰；(4)指纹图谱的质量控制：相对保留时间，2号峰尿苷0.44±0.03、3号峰鸟苷0.68±0.03、4号峰腺苷1.00；将样品的HPLC指纹图谱与对照指纹图谱进行比较。以5个共有峰计算得到的相似度应不得小于0.9，(5)虫草菌粉原料的制备：本发明重复性好，能充分反映虫草菌丝粉核苷类成分的基本特性。

主权项

1.一种扶正化瘀植物药中虫草菌粉原料指纹图谱质量控制方法，包括下列步骤：(1)提取虫草菌丝粉称取0.100g虫草菌粉，加入25ml纯净水，超声提取20-60min，提取液用0.23-0.45um滤膜过滤，进样；(2)梯度洗脱流动相用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，水和乙腈为流动相进行洗脱流动相，色谱柱为Ace水相柱；流动相A相为水，B相为乙腈；梯度洗脱：0-30min，100-93％A、0-7％B，速度0.8-1.2ml/min，检测波长210-280nm，温度20-40℃，样量5-10ul；(3)标准指纹图谱的建立确立虫草菌粉HPLC标准指纹图谱，比较样品指纹图谱中所有峰，确定4个共有峰，选取3个特征峰，分别为2号峰尿苷，3号峰鸟苷和4号峰腺苷，均经对照品对照定性和HPLC/MS鉴定，选取含量较高的腺苷作为指标成分峰。从十批样品的HPLC指纹图谱中按照以下原则选取一批虫草菌粉药材的指纹图谱作为对照指纹图谱，结合药效实验情况，优先考虑确定疗效的虫草菌丝粉的指纹图谱，将指纹图谱和定量测定结果进行对照比较，优先考虑含量在平均值附近的样品的指纹图谱，选取特征峰分离较好，峰的保留时间和峰高适宜、峰型较典型的指纹图谱，优先选取基线平稳、信噪比好的指纹图谱；(4)指纹图谱的质量控制a.样品真伪的鉴别3个特征峰相对保留时间，2号峰尿苷0.44±0.03、3号峰鸟苷0.68±0.03、4号峰腺苷1.00；b.样品质量评价将样品的HPLC指纹图谱与对照指纹图谱进行比较，4个共有峰计算得到的相似度应不得小于0.9。