[发明专利]一种铁皮石斛茎尖组培快速繁殖的育苗方法

摘要

本发明提供一种铁皮石斛茎尖组培快速繁殖的育苗方法，依次经过圆球茎诱导培养、圆球茎增殖培养、圆球茎分化培养、壮苗和生根培养后，得到生根苗，即可出瓶炼苗、移栽。本发明缩短了铁皮石斛苗的培育周期，从圆球茎至生根苗的培育周期仅为5～6个月，大大降低了生产成本，而且本发明培育的石斛苗，遗传性状稳定，其多糖和石斛生物碱含量与野生铁皮石斛相近。

主权项

1.一种铁皮石斛茎尖组培快速繁殖的育苗方法，其特征在于经过下列工艺步骤：A、圆球茎诱导培养选取健壮的野生铁皮石斛苗，用其茎尖或芽尖作为外植体，先用流水冲洗干净，再用70％的乙醇溶液消毒30～60秒，用无菌水冲洗一遍，把材料放入瓶子中，用浓度为0.1％的升汞浸泡6-10min，然后用无菌水冲洗4～5遍，接种于下列无菌诱导培养基中：B5+KT1.5～2.0mg/L+NAA0.4～0.8mg/L+浓度为10～15％的香蕉汁，在温度25-28℃、光照强度1800～2000lx、光照时间为12个小时的条件下，培养55-65天，即可形成圆球茎；B、圆球茎增殖培养将生长良好的圆球茎转接入下列增殖培养基中：B5+NAA1.5～2.0mg/L+KT0.8～1.0mg/L+浓度为10～15％的马铃薯汁，进行增殖培养，培养的环境条件为：温度25-28℃，光照强度2000～2200lx，光照13小时，培养周期为35-45天；C、圆球茎分化培养将圆球茎转入下列分化培养基中：B5+NAA0.8～1.0mg/L+KT0.1～0.5mg/L+浓度为10～15％的香蕉汁，控制温度25-28℃，光照强度2000～2200lx，光照时间12小时，培养55-65天，得到分化苗；D、壮苗和生根培养将分化苗转入下列生根壮苗培养基中：B5+NAA1.0～1.5mg/L+浓度为10～15％的香蕉汁，控制温度25-28℃，光照强度1800～2000lx，光照时间12小时，培养35-45天，得到生根苗，即可出瓶炼苗、移栽。