[发明专利]三叶青的组培快速繁殖方法

摘要

本发明公开一种三叶青的组培快速繁殖方法。包括外植体的选取与处理，诱导培养，增殖培养，生根培养，移栽等步骤。本发明以MS培养基为基础，加入了辅助剂：活性炭、聚乙烯吡咯烷酮、6－苄基腺嘌呤、激动素、玉米素、萘乙酸、吲哚丁酸等，用于三叶青丛生芽诱导、壮苗及生根三个关键阶段的组织培养。本发明的优点：(1)三叶青的生产可以在人为控制条件下进行，不受季节、气候条件与土壤等因素的制约，可排除病虫害的侵染和农药残留的影响，严格控制三叶青药材的质量。(2)增殖速度快，生产周期短，设备简单，占地面积少，能节省人力、物力等，便于工厂化生产。(3)可以保存三叶青的种质资源，同时有利于保护野生资源，减少对自然资源的破坏。

主权项

1.一种三叶青的组培快速繁殖方法，其特征在于方法的步骤如下：1)优选完整的腋芽为培养材料，经洗洁精和自来水洗净，置流水下冲洗30～40分钟后，置于75％酒精中处理20～30秒，然后在经0.1％的升汞Hgcl2 消毒6～10分钟后用无菌水冲洗，将腋芽接种于诱导培养基中，诱导培养为MS+BA1.0mg/l或MS+BA1.0mg/l+IBA0.1mg/l；2)将生长于诱导培养基上外植体转接于MS+BA0.5mg/l+NAA0.05mg/l+PVP0.5g/l、MS+BA0.5mg/l+PVP0.5g/l、MS+KT1mg/l+PVP0.5g/l、MS+KT1.0mg/l+NAA0.05mg/l+PVP0.5g/l或MS+ZT1mg/l+PVP0.5g/l上的培养基上进行增殖培养；3)将进行增殖培养的高度为3～4公分壮苗转入生根培养基中，生根培养基为1/2MS+NAA0.3mg/l或1/2MS+BA 0.05mg/l+NAA0.3mg/l+GA30.2mg/l；4)将已生根的植株取出，栽培于珍珠岩∶泥炭土为1∶1～2的混合基质上。