[发明专利]一种降低免疫细胞表面抗原位点免疫原性的方法及应用

摘要

本发明提供一种降低免疫细胞表面抗原位点免疫原性的方法，通过将¹⁸⁸Re标记至2E9/13单抗上经透析，纯化，浓缩，过滤后制备成¹⁸⁸Re－2E9/13F(ab)₂，应用于体外单向混合淋巴细胞反应模型中实现。本发明集生物学和核医学为一体，在动物实验同种肝移植中引入了¹⁸⁸Re标记的抗MHC－II单克隆抗体2E9/13F(ab)₂片段于体外供肝区域性灌注技术，解决了永久性下调同种异体MHCII类抗原的免疫原性问题，该方法具有更安全，对受者影响较小，作用更加充分等优点，具有更强的实用性和有效性。

主权项

1.一种降低免疫细胞表面抗原位点免疫原性的方法，通过将188Re标记至2E9/13单抗上经透析，纯化，浓缩，过滤后制备成188Re-2E9/13F(ab)2，应用于体外单向混合淋巴细胞反应模型中实现，具体步骤为：(1)通过木瓜蛋白酶水解2E9/13单抗后提取其中的F(ab)2片段，并经过过滤，纯化，浓缩，置于-20℃冰箱中保存；(2)从188W-188Re发生器中获取188ReO4 -洗脱液，按直接制备法将188Re标记于F(ab)2片段上，制备成188Re-2E9/13F(ab)2片段。(3)分别设生理盐水对照组，单抗组和同位素标记抗体组，每组实验动物若干进行肝移植实验，在供肝取下后体外分别灌注生理盐水，单抗和同位素标记单抗30分钟后大量生理盐水冲洗，洗静灌注物，然后植入实验动物受者体内；(4)分别观察不同时间各组的肝肾功能指标，血清细胞因子水平的变化，最后观察肝脏组织病理切片；(5)结果显示：经188Re-2E9/13F(ab)2片段离体灌注后的供肝在受者体内发生早期急性移植排斥反应的几率和程度与单纯的抗体和生理盐水灌注相比有较明显的降低。