[发明专利]三重荧光定量RT－PCR检测A、B和H5亚型流感病毒的引物、探针、试剂盒及方法

摘要

本发明公开了一种三重荧光定量RT－PCR检测A型、B型和H5亚型流感病毒的引物及探针、含有该引物和探针的检测试剂盒、以及利用该引物和探针对A型、B型和H5流感病毒进行荧光定量RT－PCR的方法。试剂盒包括：RT－PCR反应缓冲液、Taq酶、反转录酶、DEPC水、阳性对照、阴性对照。过程包括利用该引物、探针建立RT－PCR反应体系，从待测标本中提取DNA或RNA加入前述反应体系中，设定反应条件，进行RT－PCR扩增和荧光信号测定。它可在3－4小时内从被检测标本中，快速、准确、特异、安全、简便的鉴定出流感病毒的A型、B型和H5亚型，可定量分析，灵敏度高，不容易污染，且适用范围广。

主权项

1.三重荧光定量RT-PCR检测A型、B型和H5亚型流感病毒的引物及探针，其DAN序列如下：A型 上游引物：5’CAGAGACTTGAAGATGTTTTTGC， 下游引物：5’CTACGCRGCAGTCCTCGCTC， TaqMan探针：5’FAM-CAAGACCAATCCTGTCACCTCTGA-BHQ1；B型 上游引物：5’AAATACGGTGGATTAAATAAAAGCAA， 下游引物：5’CCAGCAATAGCTCCGAAGAAA， TaqMan探针：5’CY5-CACCCATATTGGGCAATTTCTATGGC-BHQ2；H5亚型 上游引物：5’CCTTTACGACAAGGTCCGACT， 下游引物：5’CCACTTATTTCCTCTCTTTTTARTCTTGCTTC， TaqMan探针：5’ROX-ACGGAACGTATGACTACCCG-BHQ2。