[发明专利]从茶叶中制备甲基化儿茶素的工艺方法

摘要

一种从茶叶中制备甲基化儿茶素的工艺方法，茶粉末先经乙醇提取，再经石油醚萃取以去除叶绿素和脂溶性成分，然后经乙酸乙酯萃取得甲基化儿茶素粗提物干粉A，再经粗聚酰胺树脂和细聚酰胺树脂分离纯化，得甲基化儿茶素粗品，最后经高效逆流色谱进一步提纯，得甲基化儿茶素纯品。本发明首先在国内建立了甲基化儿茶素的提纯工艺，得到较高纯度的甲基化儿茶素；而且本发明采用高速逆流色谱(HSCCC)制备工艺，相比于高效液相色谱(HPLC)制备工艺，高速逆流色谱不需要固体支撑体，克服了固相载体带来的样品吸附、损失、污染和峰形拖尾等缺点。且高速逆流色谱具有制备量大，综合成本低，易于工业推广等优点。

主权项

1.一种从茶叶中制备甲基化儿茶素的工艺方法，其特征在于：制备步骤1、先将茶鲜叶萎凋5～12小时，进行滚筒杀青处理，然后在80～120℃条件下干燥，经粉碎机制成颗粒大小为60～80目的茶粉；制备步骤2、用茶粉和60～80％乙醇溶液同时置于提取罐中进行固液萃取，萃取温度为70～90℃，时间为30～120分钟，料液比为1∶3～1∶10，过滤，滤渣反复萃取2～5次；制备步骤3、合并所有萃取液后进行浓缩，浓缩液和石油醚溶液按体积比1∶1～1∶2混合后，进行液液萃取，时间为5～30分钟，反复操作2～5次；制备步骤4、将所得萃余液再与乙酸乙酯按体积比为1∶1～1∶2混合，进行液液萃取，时间为5～30分钟，反复操作2～5次，所得萃取液过滤、浓缩，得浓缩液，浓缩液在60～100℃条件下干燥，得甲基化儿茶素粗提物干粉A；制备步骤5、用经预处理过的20～50目粗聚酰胺树脂装进层析柱，将甲基化儿茶素粗提物干粉A与粗聚酰胺树脂按重量比1∶1～3.5∶1充分混匀，装入层析柱，然后用20～95％的乙醇洗脱，流速为0.5～1BV/h，收集洗脱液，浓缩，在60～100℃条件下干燥得甲基化儿茶素粗提物干粉B；制备步骤6、用经预处理过的60～200目细聚酰胺树脂装进层析柱，将甲基化儿茶素粗提物干粉B与细聚酰胺树脂按重量比1∶1～3.5∶1充分混匀，装入层析柱，用甲醇和三氯甲烷按体积比为1∶1～4∶1的洗脱液进行洗脱，流速为0.1～0.5BV/h，收集洗脱液，浓缩，在60～100℃条件下干燥，得甲基化儿茶素粗品；制备步骤7、用水和甲醇按体积比7∶2～5∶2混合，配置混合液A，用乙酸乙酯和正己烷按体积比6∶1～10∶1，配制混合液B，将混合液A和混合液B均匀混合，充分饱和后，静置6～12h，取上相作为固定相，下相作为流动相；将甲基化儿茶素粗品，用流动相配制成0.5～2mg/mL的溶液M，将固定相推进逆流色谱的螺旋管柱中，调节转速为正转600～800r/min，以1～2mL/min的流速将流动相泵入，待机器稳定后将溶液M注入逆流色谱，用分布收集器进行收集，将所有含有甲基化儿茶素的收集液合并、浓缩后，浓缩液在60～100℃条件下干燥，得甲基化儿茶素纯品；所述制备步骤3、制备步骤4、制备步骤5、制备步骤6和制备步骤7的浓缩条件是温度为20～65℃，负压为0.06～0.1MPa。