[发明专利]一种由放射状土壤杆菌制备生物絮凝剂的方法

摘要

本发明提供一种由放射状土壤杆菌制备生物絮凝剂的方法，包括菌种发酵培养和生物絮凝剂的制备，选用土壤杆菌为生物絮凝剂生产菌种，经发酵培养和提取制备得水处理用生物絮凝剂。该方法与现有技术相比具有原料成本低、工艺简单、生产的絮凝剂活性高、耐热性强、无二次污染、适宜大规模生产及工业应用等特点，具有良好的推广应用价值。

主权项

1. 一种生物絮凝剂的制备方法，其特征在于：选用放射状土壤杆菌为生物絮凝剂菌种，经发酵培养和提取得水处理生物絮凝剂，该生物絮凝剂的制备采用以下步骤：菌种的制备初选培养基的重量组成(g/L)：K2HPO40.5-1MgSO4·7H2O0.3-0.5FeSO4·7H2O0.01-0.03NaNO33-5KCl0.5-0.8蔗糖30-50琼脂15-20pH6.6-7.0。初选方法：将活性污泥系列稀释，涂布接种到筛选培养基上，30-32℃培养36-48hr，挑取生长迅速、菌体表面粘稠的菌株接种到固体斜面，30-32℃培养36-48hr，4℃保藏，备用；复筛培养基的重量组成(g/L)：蔗糖20-50酵母膏0.2-0.5尿素0.2-0.5NaCl0.1-0.2K2HPO43-5(NH4)2SO40.2-0.5MgSO4·7H2O0.2-0.3pH7.0-7.5；复筛方法：从斜面上挑取菌苔接种于含有复筛培养基的三角瓶中，接种后培养条件为90-120转/分，30-32℃旋转式振荡培养36hr，测定发酵液的絮凝活性；筛选得到的放射状土壤杆菌的菌种特征为：菌落凸起，全缘光滑。可产生3-酮基乳糖，接触酶、氧化酶和尿素酶阳性，可利用阿拉伯糖、葡萄糖、蔗糖、果糖、乳糖、麦芽糖、木糖、甘露糖、鼠李糖、有机酸盐和氨基酸作为碳源，不能利用纤维素、淀粉、琼脂糖、半乳糖作为碳源，可利用硝酸盐作为氮源；2)产絮凝剂菌种发酵培养絮凝剂发酵培养基的重量组成(g/L)：蔗糖20-50酵母膏0.2-0.5尿素0.2-0.5NaCl0.1-0.2K2HPO43-5(NH4)2SO40.2-0.5MgSO4·7H2O0.2-0.3pH7.0-7.5将放射状土壤杆菌菌种按培养基总重量的3-5％的比例接种于装有絮凝剂发酵培养基的三角瓶中(发酵培养基装样量为150-200ml/500ml三角瓶)，接种后培养条件为30-32℃，90-120转/分旋转式振荡培养36-48hr备用；3)生物絮凝剂的提取与制备a)发酵液通过离心机离心分离10-20分钟，除去沉淀，取上清液备用；b)向上清液中加入0.1—0.2％CaCl2和2-3倍体积的95％乙醇，玻璃棒搅拌，沉淀5-10分钟得沉淀物；c)将沉淀物用无水乙醇清洗，真空干燥得生物絮凝剂产品。