[发明专利]基于蛋白芯片的免疫共沉淀检测蛋白相互作用的方法以及一种蛋白相互作用检测试剂盒无效
申请号: | 200710118027.0 | 申请日: | 2007-06-27 |
公开(公告)号: | CN101105493A | 公开(公告)日: | 2008-01-16 |
发明(设计)人: | 刘琼明;林从;何为;许丹科 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所 |
主分类号: | G01N33/539 | 分类号: | G01N33/539;G01N21/64;G01N33/577 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人: | 鲁兵 |
地址: | 100850北京市海淀区太*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)对于所有生物学过程都至关重要,因此,蛋白质相互作用研究一直是细胞生物学与分子生物学领域的一大研究热点。免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,CoIP)是以抗体和抗原之间的特异性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法,是发现和验证PPI最常用、最有效的方法。传统的基于树脂的CoIP步骤复杂、费时费力,难以实现PPI的通量化检测。本发明的核心是:利用重组蛋白的表位标签,在固定了抗标签抗体的玻璃醛基片上进行CoIP,再通过荧光标记的抗体进行相互作用的检测。该方法大大简化了传统CoIP的操作步骤,同时检测样品的通量化大大提高,是一个简便、快速、高通量研究PPI的新型技术平台。 | ||
搜索关键词: | 基于 蛋白 芯片 免疫 共沉淀 检测 相互作用 方法 以及 一种 试剂盒 | ||
【主权项】:
1.一种基于蛋白芯片的免疫共沉淀检测蛋白相互作用的方法,其特征在于, 制备一Flag抗体芯片,然后将含有Flag-诱饵融合蛋白和Myc-猎物融合蛋白的细胞裂解液加入到芯片表面进行免疫共沉淀反应,经荧光标记c-Myc抗体检测诱饵蛋白和猎物蛋白是否具有相互作用。
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