[发明专利]植物叶际微生物基因组DNA提取方法无效
| 申请号： | 200710120511.7 | 申请日： | 2007-08-21 |
| 公开（公告）号： | CN101372703A | 公开（公告）日： | 2009-02-25 |
| 发明（设计）人： | 张洪勋;张保国;杜方舟;唐玲;谷立坤;白志辉 | 申请（专利权）人： | 中国科学院生态环境研究中心 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100085*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，涉及一种可用于PCR扩增的植物叶际微生物基因组DNA提取方法。将叶子样品浸泡在灭菌的磷酸盐缓冲液中，经恒温摇床震荡和超声波处理使叶际微生物与植物叶子分离，收集好的菌体用0.1％的焦磷酸钠和洗涤缓冲液分别洗涤，然后依次用适量的溶菌酶、蛋白酶K和SDS处理，裂解细胞使DNA释放出来，最后经氯仿抽提蛋白，异丙醇沉淀即得到高质量的可直接用于PCR扩增的植物叶际基因组DNA。 | ||
| 搜索关键词： | 植物 微生物 基因组 dna 提取 方法 | ||
【主权项】：
1.一种可直接用于PCR扩增的植物叶际微生物基因组DNA的提取方法，其特征在于，提取步骤包括：将植物叶片样品浸泡在灭菌的磷酸盐缓冲液中，摇床震荡处理10—30min，然后用超声波处理2—8min，使叶片上附生的微生物与叶片分离；离心收集菌体，用0.1％的焦磷酸钠和洗涤缓冲液分别洗涤两次；裂解液中分别加入溶菌酶、蛋白酶K和十二烷基硫酸钠处理，使菌体裂解释放出DNA；然后经氯仿抽提蛋白，异丙醇沉淀即得到高质量的可直接用于PCR扩增的植物叶际基因组DNA。
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