[发明专利]中肋骨条藻细胞色素b基因的RFQ－PCR检测方法无效
| 申请号： | 200710121498.7 | 申请日： | 2007-09-07 |
| 公开（公告）号： | CN101130821A | 公开（公告）日： | 2008-02-27 |
| 发明（设计）人： | 甄毓;何闪英;孙静;赵丽媛;于志刚;米铁柱 | 申请（专利权）人： | 中国海洋大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京思海天达知识产权代理有限公司 | 代理人： | 张慧 |
| 地址： | 266100山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种中肋骨条藻细胞色素b基因的RFQ－PCR检测方法，包括：a.提取作为标准样品的中肋骨条藻RNA；b.分离并克隆中肋骨条藻细胞色素b基因，得到700～740bp的中肋骨条藻细胞色素b基因序列，并从GenBank上获取分类地位与中肋骨条藻相近的多个藻种的细胞色素b序列，构建系统树；c.进行RFQ－PCR；d.根据获得的700～740bp的中肋骨条藻细胞色素b基因序列构建标准曲线，通过标准曲线检测待测中肋骨条藻细胞色素b基因。本发明检测方法，可以用于中肋骨条藻的定量、或作为中肋骨条藻检测中的管家基因研究浮游藻种群变迁、构建生态动力学模型乃至赤潮预测等领域。 | ||
| 搜索关键词： | 肋骨 细胞 色素 基因 rfq pcr 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种中肋骨条藻细胞色素b基因的RFQ-PCR检测方法，其特征在于，包括以下步骤：a.提取中肋骨条藻RNA；b.分离并克隆中肋骨条藻细胞色素b基因，得到700～740bp的中肋骨条藻细胞色素b基因序列，并从GenBank上获取分类地位与中肋骨条藻相近的多个藻种的细胞色素b序列，构建系统树；c.将获得的中肋骨条藻细胞色素b基因序列为靶区域，设计适用于RFQ-PCR方法的引物与探针，进行RFQ-PCR；d.根据获得的700～740bp的中肋骨条藻细胞色素b基因导入质粒并转载到大肠杆菌中，经大量培养，提取所述质粒作为标准品，序列构建标准曲线，通过标准曲线检测待测中肋骨条藻细胞色素b基因。
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