[发明专利]从哺乳动物凝固血中提取基因组DNA的方法无效
| 申请号： | 200710121677.0 | 申请日： | 2007-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN101153309A | 公开（公告）日： | 2008-04-02 |
| 发明（设计）人： | 张沅;刘锐;孙东晓;张毅;张剑 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 100094*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种从哺乳动物凝固血中提取基因组DNA的方法，该方法包括以下步骤：1)将剪碎的哺乳动物凝固血用双蒸水清洗去除血红素，再将其与裂解液按体积比为3－5∶5混合，向混合液中加入蛋白酶K至终浓度为360－400mg/mL混合液，然后将混合液在55－65℃下水浴3－6小时至溶液中不再有粘稠的团块；2)将步骤1)获得的混合液与5.5－6.5M NaCl溶液和氯仿按体积比为1∶0.5－0.9∶1.5－1.9混合后，振荡，再离心，留上清；3)将上清液与体积/体积百分浓度为90－100％的冰乙醇按体积比1∶0.8－1.2混匀，得到的白色沉淀为基因组DNA。本发明将在哺乳动物基因组DNA的提取及奶牛或其它畜种的功能基因组研究中发挥重要作用，应用前景广阔。 | ||
| 搜索关键词： | 哺乳动物 凝固 提取 基因组 dna 方法 | ||
【主权项】：
1.一种从哺乳动物凝固血中提取基因组DNA的方法，包括以下步骤：1)将剪碎的哺乳动物凝固血用双蒸水清洗去除血红素，再将其与裂解液按体积比为3-5∶5混合，向混合液中加入蛋白酶K至终浓度为360-400mg/mL混合液，然后将混合液在55-65℃下水浴3-6小时至溶液中不再有粘稠的团块；所述裂解液由NaCl、Na2-EDTA和SDS组成，它们的浓度依次为140-160mM、40-60mM和1-2克/100毫升裂解液；2)将步骤1)获得的混合液与5.5-6.5M NaCl溶液和氯仿按体积比为1∶0.5-0.9∶1.5-1.9混合后，振荡，再离心，留上清；3)将上清液与体积/体积百分浓度为90-100％的冰乙醇按体积比1∶0.8-1.2混匀，得到的白色沉淀为基因组DNA。
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