[发明专利]一种乳糖酶膜的制备方法

摘要

本发明公开了一种乳糖酶膜的制备方法，旨在提供一种可以和不同氧化还原电极配合使用，并适合于乳糖在线监控的一个核心部件－核微孔固定化酶膜。该方法包括下述步骤：称取β－环糊精溶解于含有戊二醛的低浓度氢氧化钠溶液中，室温放置，使之交联成固体状态，用蒸馏水冲洗析出的晶体，避光晾干后碾磨，便制得醛基化β－环糊精微球。取上述固定材料与混合酶溶液充分混合，4摄氏度下放置8分钟；取固定化的酶均匀涂抹于两张聚碳酸酯微孔膜上，再滴上海藻酸钠溶液，制成三明治结构的酶膜后，浸入CaCl₂溶液后取出，用缓冲液冲洗制成乳糖酶膜。本发明的方法制成的核微孔固定化酶膜可以灵活地和其它氧化还原电极配合使用，具有普遍适用性。

主权项

1.一种乳糖酶膜的制备方法，其特征是，包括下述步骤：(1)称取β-环糊精溶解于含有戊二醛的低浓度氢氧化钠溶液中，室温放置，使之交联成固体状态，用蒸馏水冲洗析出的晶体直到冲洗液的pH值为中性，避光晾干后碾磨，便制得醛基化β-环糊精微球；其中β-环糊精与含有戊二醛的低浓度氢氧化钠溶液的质量体积比为1∶5；(2)取上述醛基化β-环糊精微球作为固定材料与混合酶溶液充分混合后，4摄氏度下放置8分钟使酶固定化；取0.1g上述固定化的酶均匀涂抹于两张聚碳酸酯微孔膜上，再滴上1滴2％的海藻酸钠溶液，制成三明治结构的酶膜后，浸入CaCl2溶液10秒钟后取出，用缓冲液冲洗3遍以上，制成乳糖酶膜；其中固定材料与混合酶溶液的质量体积比为10∶1，所述混合酶溶液由葡萄糖氧化酶、β-半乳糖苷酶、牛血清白蛋白混合而成。