[发明专利]一种测定土壤微生物生物量氮的方法

摘要

本发明涉及一种测定土壤微生物生物量氮的方法，采用熏蒸-浸提的方法对土样进行处理：以不熏蒸土样为对照，将熏蒸和不熏蒸土样分别用4倍重量体积的0.5M硫酸钾溶液振荡浸提，过滤，得浸提液；向消煮管中依次加入5ml浸提液、3g混合加速剂、以及8ml浓硫酸，摇匀。缓慢加热至硫酸发烟，高温消煮3h至溶液澄清，冷却。将消煮产物无损失的转移至蒸馏瓶中，同时加入NaOH溶液进行蒸馏，硼酸接收，标准盐酸溶液进行滴定。本发明方法重复性好，重现性高，简单易行。

主权项

1.一种测定土壤微生物生物量氮的方法，其特征在于：1)采用熏蒸-浸提的方法对土样进行处理：以不熏蒸土样为对照，将熏蒸和不熏蒸土样分别用4倍重量体积的0.5M硫酸钾溶液振荡浸提，过滤，得浸提液，分别进行以下步骤2)-4)中的操作；2)向消煮管中一次加入浸提液5.0ml，混合加速剂1-3g，以及浓硫酸8-10ml，摇匀；3)采用梯度升温的方式对上述溶液进行加热：溶液预先加热至100-110℃，开始梯度升温，依次使溶液于9-10min内升温至120-130℃、10-12min内升温至140-155℃、11-13min内升温至160-170℃、12-14min内升温至180-195℃、13-15min内升温至200-220℃、14-17min内升温至205-240℃、16-19min内升温至240-260℃、45-65min内升温至340-380℃，恒温3-4h后，冷却；4)将消煮管中的溶液倒入蒸馏瓶中，用蒸馏水洗涤消煮管2-3次，每次蒸馏水用量为10-20ml，同时加入70-100ml 10M NaOH溶液进行蒸馏，采用硼酸接收，采用已知浓度的标准盐酸溶液进行滴定，确定所消耗的盐酸溶液的用量；5)配制乙酰苯胺标准溶液：取乙酰苯胺试剂1.9296克，加二次蒸馏水溶解，定容至1000ml容量瓶中，此溶液含有有机氮200mg/l，以此溶液为母液进行逐级稀释至0-40倍；选取稀释后任意浓度的乙酰苯胺溶液5.0ml进行以下步骤2)-4)中的操作；以蒸馏水5.0ml、混合加速剂1-3g、浓硫酸8-10ml配制的溶液为对照组，将对照组同样进行以下步骤2)-4)中的操作；按如下过程对试验结果的计算：a.计算标准物质的回收率：其中：V_空白—滴定对照组时所消耗的HCl溶液体积，V_标准物质—滴定乙酰苯胺溶液时消耗的HCl溶液体积，n_标准物质—乙酰苯胺的质量浓度，5—吸取乙酰苯胺溶液的体积。b.有机氮含量的计算：其中：V_熏蒸—滴定熏蒸样品时所消耗的HCl溶液体积，V_未熏蒸—滴定未熏蒸样品时所消耗的HCl溶液体积，ts—样品的稀释倍数，m—烘干土质量；c.微生物生物量氮的计算：ω(N)＝E_N/K_EN其中：E_N—薰蒸土样有机氮量与未薰蒸土样有机氮之差，K_EN—薰蒸杀死微生物体中的氮被浸提出来的比例，通常取0.45。