[发明专利]一种钩端螺旋体的检测方法

摘要

本发明公开了一种钩端螺旋体的检测方法。即基于核酸等温扩增定量检测技术。本发明通过使用特异性引物，利用LAMP技术平台扩增靶基因的特定区域，在一系列质控和内对照检测体系的辅助下，从分子水平对钩端螺旋体进行检测，可实现对微量样本的定性定量检测。本发明与现有技术相比具有的有益效果：(1)等温扩增降低非特异性扩增几率，特异性好；(2)检测速度快、灵敏度高；(3)不需要特殊的设备，成本低；(4)操作简便，易于推广。本发明适用于试验研究、临床检测、环境检测等，具有广阔的应用前景。

主权项

1.一种钩端螺旋体的核酸检测方法，其特征在于通过使用特异性引物，利用LAMP技术平台扩增靶基因的特定区域，在阳性和阴性质控和内参检测体系的辅助下，从分子水平对钩端螺旋体进行核酸筛查或检测；具体步骤如下：1)根据钩端螺旋体LipL41基因序列设计LAMP反应特异性引物；2)提取钩端螺旋体基因组DNA；3)扩增LipL41基因片段构建重组质粒载体用于该LAMP反应的灵敏度分析；4)分别以含LipL41基因的重组质粒DNA或钩端螺旋体基因组DNA为模板进行LAMP反应；5)对LAMP反应的结果进行判定；6)对LAMP反应产物进行酶切，根据酶切片段的大小确定反应产物的特异性。