[发明专利]农杆菌介导马铃薯转hrap基因获得抗病性表达的方法无效
| 申请号： | 200710200922.7 | 申请日： | 2007-06-28 |
| 公开（公告）号： | CN101117639A | 公开（公告）日： | 2008-02-06 |
| 发明（设计）人： | 黄先群;林忠平;蒋敏华;李丽;陈坚;毛堂芬;董颖苹;冯腾永 | 申请（专利权）人： | 贵州省生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N15/87 | 分类号： | C12N15/87;C12N15/33;C12N5/04;A01H4/00;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 贵阳中新专利商标事务所 | 代理人： | 郭防 |
| 地址： | 550006*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用农杆菌介导hrap基因获得抗病马铃薯植株的方法。该方法与细菌的致敏蛋白harpinPss混合接种之后，均能在接种植物的细胞间隙中促进harpinPss所引发的过敏反应)，解离harpinPss的多聚体。因此，其抗病效果更好，能提高马铃薯植株的抗病性。将hrap基因通过农杆菌介导入马铃薯植株中，使马铃薯植株具有抗晚疫病和青枯病的能力。本发明采用的技术方案是：将经过预培养的外植体接种于农杆菌菌液中浸染，浸染后的外植体经共培养、诱导愈伤、诱导生芽和生根培养选择，选择根选两次都能生根的试管苗扩繁后转移盆栽得转化植株，转化植株用PCR检测和Southern杂交检测方法筛选阳性植株，经活体接种抗病性鉴定获得抗病马铃薯植株。本发明方法改良了外植体愈伤和生芽的诱导，提高了农杆菌介导的能力。对外植体进行两次根选，剔除了转化过程中的假阳性植株，避免了对假阳性植株的后继培养，节省劳动力，降低了生产成本。 | ||
| 搜索关键词： | 杆菌 马铃薯 hrap 基因 获得 抗病性 表达 方法 | ||
【主权项】：
1.一种农杆菌介导马铃薯转hrap基因获得抗病性表达的方法，其特征在于：经过预培养的外植体接种于携带质粒pBI hrap的农杆菌LBA4404的菌液中浸染，浸染后的外植体经共培养、诱导愈伤、诱导生芽和生根培养选择，选择根选两次都能生根的试管苗扩繁后转移盆栽得转化植株，转化植株用PCR检测和Southern杂交检测方法筛选阳性植株，经活体抗病性接种鉴定获得抗病马铃薯植株。
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