[发明专利]一种兔抗人MK单克隆抗体及其杂交瘤细胞株和应用无效
申请号: | 200710301302.2 | 申请日: | 2007-12-26 |
公开(公告)号: | CN101255194A | 公开(公告)日: | 2008-09-03 |
发明(设计)人: | 姚行;戴利成;钱福初 | 申请(专利权)人: | 湖州市中心医院 |
主分类号: | C07K16/24 | 分类号: | C07K16/24;C12N5/16 |
代理公司: | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 | 代理人: | 徐关寿 |
地址: | 313000*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及一种兔抗人MK单克隆抗体及其杂交瘤细胞株和应用。所述兔抗人MK单克隆抗体由以下方法获得:以GST-MK融合蛋白为抗原获得的免疫后兔脾细胞,与兔骨髓瘤样240E细胞进行细胞融合,选择与GST-MK融合蛋白呈阳性反应、而与GST蛋白呈阴性反应的杂交瘤细胞,进行亚克隆并扩大培养,得到所述兔抗人MK单克隆抗体。本发明以GST-MK融合蛋白作为抗原,既增加抗原的免疫原性,方便筛选。用兔骨髓瘤样240E细胞应用杂交瘤技术进行制备,融合蛋白筛选阳性克隆,选择与GST-MK蛋白反应而与GST不反应的特异性杂交瘤细胞株为阳性细胞株;在western bloting鉴定,得到特异性抗MK的单克隆抗体,该单克隆抗体可与人MK特异性结合,可应用于人血清中MK检测。 | ||
搜索关键词: | 一种 兔抗人 mk 单克隆抗体 及其 杂交瘤 细胞株 应用 | ||
【主权项】:
1、一种兔抗人MK单克隆抗体,由以下方法获得:以GST-MK融合蛋白为抗原获得的免疫后兔脾细胞,与兔骨髓瘤样240E细胞进行细胞融合,选择与GST-MK融合蛋白呈阳性反应、而与GST蛋白呈阴性反应的杂交瘤细胞,进行亚克隆并扩大培养,得到所述兔抗人MK单克隆抗体。
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