[发明专利]一种增强土著根瘤菌固氮能力的生物源激活剂

摘要

一种增强土著根瘤菌固氮能力的生物源激活剂，其采用以下方法制成：(1)哈茨木霉菌株T216母种斜面培养；(2)发酵罐发酵；(3)发酵完成后，发酵液用氢氧化钠溶液调pH为7－8，闷罐过夜，灭菌纱布真空过滤，得滤液，密封包装。在豆科作物播种前，将本发明之生物源激活剂按20－30％(体积比)添加入浸种液浸泡种子4－6小时，或在豆科作物幼苗移栽时，用清水稀释4－5倍的生物源激活剂浸根半小时，作物生长期间，能诱导土著根瘤菌结瘤固氮能力显著增强。

主权项

1、一种增强土著根瘤菌固氮能力的生物源激活剂，其特征在于，采用以下方法制成：(1)将保藏编号为CCTCC №：M207141的哈茨木霉Trichoderma harzianum菌株T216接种到装有150mL液体培养基的三角瓶中，于27±1℃下转速为150转/分，培养60小时，作为发酵种子用；液体培养基组分为：可溶性淀粉10g，葡萄糖20g，蛋白胨5g，KH2PO4 1g，MgSO·7H2O 0.5g，CaCO3 0.25g，(NH4)2SO4 2g，水1000mL，PH自然，经115℃灭菌15-20分钟；(2)发酵罐发酵：将第(1)步所得木霉菌种子培养液按10％(V/V)的接种量接入发酵罐进行发酵培养，发酵控制参数为：温度控制，分为两个阶段，发酵第一阶段，即菌体培养阶段0-72小时，26-28℃；发酵第二阶段，即代谢产物生产阶段72-100小时，23-25℃；通气量(V/V)：0-20小时：1∶0.6；20-40小时：1∶0.8；40-80小时：1∶1.2，80小时以后：1∶0.6；搅拌速度：250-300rpm；初始pH值控制为6.5-6.8，前24小时维持在初始值；发酵罐培养基组分：1.5-2.0％麦麸汁液，0.5-1.0％葡萄糖，2.0-3.0％玉米粉，1.0-2.0％酵母膏，0.1-0.5％CaCO3，0.01-0.03％MgSO4，0.5-0.8％KH2PO4和K2HPO4，pH值为6.5-6.8，余量为水；通入蒸气达121℃在位灭菌30分钟；所述百分比均为重量百分比；(3)发酵完成后，发酵液用氢氧化钠溶液调pH为7-8，闷罐过夜，灭菌纱布真空过滤，得滤液，密封包装，即成。