[发明专利]同型乳酸的嗜热芽孢杆菌的遗传修饰

摘要

本发明涉及用于兼性厌氧且同型乳酸的中度嗜热芽孢杆菌属(Bacillus)物种的工业应用的遗传修饰。本发明包括用于通过遗传改造来修饰兼性厌氧且同型乳酸的中度嗜热芽孢杆菌属物种的方法，所述方法包括将克隆在包含pSH71复制子或其同系物的热敏感型质粒系统中的DNA引入兼性厌氧且同型乳酸的中度嗜热芽孢杆菌属物种的细胞中；于对于质粒复制而言的许可温度下在选择培养基上培养所述细胞，以选择能够于所述许可温度下在所述选择培养基上生长的经转化的细胞；于对于质粒复制而言的非许可温度下在选择培养基上培养所述经转化的细胞，以选择能够于所述非许可温度下在所述选择培养基上生长的经转化的细胞。本发明的方法可用于修饰芽孢杆菌以用于R－乳酸的生产，除乳酸以外的其他有机酸、醇、酶、氨基酸和维生素的生产。特别地，本发明提供了一种方法，其中通过将编码S－乳酸脱氢酶的基因替换为包含编码R－乳酸脱氢酶的DNA序列的DNA构建体来修饰芽孢杆菌属物种。

主权项

1.用于通过遗传改造来修饰兼性厌氧且同型乳酸的中度嗜热芽孢杆菌属物种的方法，所述方法包括:将克隆在包含pSH71复制子或其同系物的热敏感型质粒系统中的DNA引入兼性厌氧且同型乳酸的中度嗜热芽孢杆菌属物种的细胞中；于对于质粒复制而言的许可温度下在选择培养基上培养所述细胞，以选择能够于所述许可温度下在所述选择培养基上生长的经转化的细胞；于对于质粒复制而言的非许可温度下在选择培养基上培养所述经转化的细胞，以选择能够于所述非许可温度下在所述选择培养基上生长的经转化的细胞。