[发明专利]一种利用阴离子交换柱辅助聚乙二醇修饰水蛭素的方法无效
| 申请号： | 200810011554.6 | 申请日： | 2008-05-21 |
| 公开（公告）号： | CN101279999A | 公开（公告）日： | 2008-10-08 |
| 发明（设计）人： | 修志龙;李雪芹;李晓晖 | 申请（专利权）人： | 大连理工大学 |
| 主分类号： | C07K1/107 | 分类号： | C07K1/107;C07K1/04 |
| 代理公司： | 大连理工大学专利中心 | 代理人： | 侯明远 |
| 地址： | 116024辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 一种利用阴离子交换柱辅助聚乙二醇(PEG)修饰水蛭素的方法，属于蛋白修饰技术领域。本发明的特征是采用离子交换柱辅助蛋白进行PEG修饰。反应pH为6～9，反应时间15～120min，水蛭素与PEG摩尔比1∶3～1∶9。离子交换柱为强阴离子交换柱，带电基团为季氨基。柱中基质为交联葡聚糖或琼脂糖，基质平均粒径范围30～90μm。本发明的效果和益处是简化蛋白修饰中反应和分离的步骤，相应减少各个步骤之间样品的损耗，洗脱水蛭素脱盐后可以回收。与传统的液相方式修饰相比，可以得到体外活性很高的单PEG化水蛭素。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 阴离子 交换 辅助 聚乙二醇 修饰 水蛭 方法 | ||
【主权项】：
1.一种利用阴离子交换柱辅助聚乙二醇修饰水蛭素的方法，其特征包括以下步骤：(A)将溶于磷酸盐缓冲液a中的水蛭素上样于经相同缓冲液平衡的离子柱中，直至全部样品吸附于离子交换介质上，没有洗脱物流出为止；(B)将溶于a液中的活化聚乙二醇溶液上样于步骤A的柱中，至全部溶液充满离子柱，停止上样；(C)待反应结束后，用a液冲洗步骤B的反应离子柱，至无洗脱物流出；用含有氯化钠或氯化钾的a液对步骤B柱子中物质进行洗脱，并收集洗脱组分。
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