[发明专利]β－葡萄糖苷酶在转化白藜芦醇苷制备白藜芦醇中的应用

摘要

本发明公开了一种β－葡萄糖苷酶在转化白藜芦醇苷制备白藜芦醇中的应用，主要涉及(1)菌种选择，(2)制备β－葡萄糖苷酶粗酶液，(3)酶转化白藜芦醇苷反应，(4)转化液收集，(5)白藜芦醇的提取纯化等步骤。本发明利用微生物产生的β－葡萄糖苷酶粗酶液对白藜芦醇苷进行转化，收率高，产物较单一，白藜芦醇的分离提取步骤简单，极易规模化生产，具有极好的市场前景并能产生可观的经济效益。

主权项

1.β-葡萄糖苷酶在转化白藜芦醇苷制备白藜芦醇中的应用，其特征在于，以下述步骤实现：(1)菌种选择：选用桔青霉CGMCC 3.2938，少根根霉CGMCC No.1963，杨奇青霉CGMCCNO.0668，绿色木霉CGMCC No.1962，毛霉CGMCC NO.0151，黑曲霉CGMCC 0496，黑曲霉CGMCC 0751，土曲霉CGMCC No.0569中的一种菌作为产β-葡萄糖苷酶的菌种；(2)制备β-葡萄糖苷酶粗酶液：将步骤(1)所述菌种以常规量接种于β-葡萄糖苷酶产酶培养基中，在25℃～50℃，摇床转速120～220rpm的条件下，产酶发酵12～144小时，然后将所有发酵物在5000～10000r/min的转速下离心15～40min，收集上清液即获得β-葡萄糖苷酶粗酶液；(3)酶转化白藜芦醇苷反应：取含有白藜芦醇苷的植物样品，将其粉碎至60目，然后按1g粉碎的样品比5～10ml粗酶液的比例，向粉碎的样品中加入步骤(2)制得的β-葡萄糖苷酶粗酶液，充分搅拌后于25℃～45℃条件下静置转化反应10～24小时；或充分搅拌后置于25℃～45℃、摇床转速80～180rpm条件下转化反应5～24小时；(4)转化液收集：将步骤(3)转化反应后的所有物料以4000～8000r/min条件离心10～15min，收集上清液即得含白藜芦醇的溶液；(5)白藜芦醇的提取纯化：向步骤(4)获得的含白藜芦醇的溶液中加入其1倍体积量的50～95％的乙醇，在50℃～100℃温度下进行加热回流提取，得纯β-葡萄糖苷酶转化产物——白藜芦醇液。