[发明专利]一种海参及海参制品中海参多糖含量的测定方法

摘要

本发明公开了一种海参及海参制品中海参多糖含量的测定方法，其特征在于先将海参及海参制品用蛋白酶酶解，采用醇沉分离出酶解产生的海参多糖，再用三氟乙酸水解制出供试液，配制岩藻糖标准水溶液，以1－苯基－3－甲基－5－吡唑啉酮衍生，所得衍生物经高效液相色谱测定其中岩藻糖衍生物的峰面积，以岩藻糖为基准计算得出样品中海参制品中的海参多糖含量。本发明为各种海参及海参制品中海参多糖的测定提供了一种简便、准确、可靠的标准化定量分析方法。

主权项

1、一种海参及海参制品中海参多糖含量的测定方法，其特征在于：(1)取海参或海参制品，用蛋白酶于缓冲业液中酶解，将酶解液离心，取上清液用2-5倍体积的乙醇使海参多糖沉淀，离心，所得沉淀用水溶解后定容至1-100ml；(2)取0.1-1ml所得水溶液，加入等体积0.5-6mol/L的三氟乙酸水溶液，氮气封管，在100-120℃下水解1-12h；将所得水解液吹干和/或加碱中和，用水定容至0.1-10ml，过滤，作为供试液；(3)精确称取岩藻糖标准品，配成浓度为0.01mmol/L-1mmol/L呈梯度的多个标准水溶液；(4)分别精密吸取相同体积的上述多个标准水溶液，分别加入0.1-0.5mol/L的NaOH水溶液和等体积的1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生试剂，50-70℃下水浴衍生0.2-2h，冷却，用酸的水溶液中和至中性，用氯仿萃取，吸弃下层，重复萃取2-6次，将水层过滤，进行液相色谱分析，得到分离谱图，以所得谱图中岩藻糖的峰面积对岩藻糖的浓度进行线性回归，得到回归方程；(5)取上述供试液进行衍生和液相色谱分析，以岩藻糖衍生物的峰面积代入上述回归方程中，求出样品中岩藻糖的含量；将岩藻糖的含量乘以转化系数即得海参样品中海参多糖的含量。