[发明专利]一种治疗妇科子宫肌瘤的药物组合物的质量检测方法

摘要

本发明涉及中药质量检测领域，公开了一种治疗妇科子宫肌瘤的药物组合物的质量检测方法，该方法包括治疗妇科子宫肌瘤的药物的鉴别、检查、浸出物以及含量测定等步骤。本发明通过薄层色谱法，实现了对水蛭、莪术、大黄素、大黄素甲醚、蛇床子素、桃仁、芍药苷、黄芩苷鉴别，同时采用高效液相色谱法对君药血竭有效成分血竭素的含量的准确测定，本品每粒含血竭以血竭素C₁₇H₁₄O₃计，不得少于0.50mg。本发明方法操作简便，准确先进，线性关系、重现性、精密度、稳定性、回收率均较好，能够有效的控制产品的质量，保证产品疗效。

主权项

1、一种治疗妇科子宫肌瘤的药物组合物的质量检测方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(1)取所述药物组合物5g，加甲醇10～30mL，浸渍50～80分钟，滤过，取滤液5～25mL，蒸干，残渣加水5～25mL使溶解，再加盐酸0.5～1.5mL，置水浴中加热20～40分钟，立即冷却，用乙醚提取2～3次，每次10～30mL，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇0.5～1.5mL使溶解，作为供试品溶液；另取水蛭对照药材0.5g，加60％～80％乙醇10mL，冷浸12小时，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯为展开剂，苯∶乙酸乙酯的体积比为30∶1，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同的荧光斑点；(2)取所述药物组合物5g，加乙醚10～30mL，冷浸3～5小时，过滤，用乙醚洗涤残渣，合并，滤液蒸干，加三氯甲烷1～3mL充分溶解，作为供试品溶液；另取莪术对照药材2g，同供试品制备方法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯为展开剂，石油醚和乙酸乙酯的体积比为18∶2，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)取所述药物组合物5g，加甲醇10～30mL浸渍50～80分钟，滤过，取滤液5～25mL，蒸干，残渣加水5～25mL使溶解，再加盐酸0.5～1.5mL，置水浴中加热20～40分钟，立即冷却，用乙醚提取2～3次，每次10～30mL，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇0.5～1.5mL使溶解，作为供试品溶液；另取大黄素和大黄素甲醚对照品，分别加甲醇制成每1mL含1mg大黄素或1mg大黄素甲醚的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μL，大黄素对照品和大黄素甲醚对照品各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，石油醚、甲酸乙酯和甲酸的体积比为15∶5∶1，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点；(4)取所述药物组合物5g，加乙醚8～20mL，冷浸3～5小时，滤过，将滤液浓缩至干，残渣加甲醇溶解至3～6mL，作为供试品溶液；另取蛇床子素对照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg蛇床子素的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15μL，对照品溶液6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯为展开剂，苯和乙酸乙酯的体积比为30∶1，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(5)取所述药物组合物5g，加甲醇10～30mL，浸渍40～80分钟，滤过，滤液蒸干，加水10～20mL使溶解，再加盐酸0.5～1.5mL，置水浴中加热20～40分钟，立即冷却，用乙醚分1～3次提取，每次10～30mL，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇0.5～2mL使溶解，作为供试品溶液；另取桃仁对照药材1g，加乙醚5～15mL，超声处理3～10分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚-乙酸乙酯为展开剂，石油醚和乙酸乙酯的体积比为18∶2，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸溶液，烘约2～8分钟，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的紫红色的斑点；(6)取所述药物组合物5g，加水10～20mL，搅拌使溶解，转移至分液漏斗中，加以水饱和的正丁醇提取1～3次，每次10～20mL，合并正丁醇提取液，用正丁醇饱和的水洗涤1～3次，每次5～15mL，弃去水液，正丁醇液置水浴上浓缩至约0.5～2mL，加适量的中性氧化铝在水浴上拌匀干燥，装入预先装填好的中性氧化铝小柱，以50～80mL乙酸乙酯-甲醇洗脱，乙酸乙酯和甲醇的体积比为1∶1，收集洗脱液，蒸干，残渣加乙醇0.5～2mL使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1mL含2mg芍药苷的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇和甲酸的体积比为40∶5∶10∶0.2，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，烘2～8分钟，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(7)取所述药物组合物5g，加乙醚30～50mL，加热回流40～80分钟，滤过，药渣挥干乙醚，加甲醇20～40mL，加热回流50～80分钟，滤过，滤液挥干，残渣加水30～60mL使溶解，用正丁醇提取2～4次，每次15～30mL，合并正丁醇溶液，用水洗涤2～4次，蒸干，残渣加甲醇3～8mL使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1mL含1.5mg黄芩苷的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水为展开剂，乙酸乙酯、丁酮、甲酸和水的体积比为5∶3∶1∶1，预平衡10～50分钟，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(8)血竭素的含量测定：分别制备供试品溶液和对照品溶液，用高效液相色谱法测定；对照品为：血竭素高氯酸盐；色谱条件与系统适用性为：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液为流动相，乙腈和0.05mol/L磷酸二氢钠溶液的体积百分比为30～70∶30～70，A为乙睛，B为0.05mol/L磷酸二氢钾，A+B＝100％；UVD检测器，检测波长为440nm；柱温30～40℃，理论塔板数按血竭素高氯酸盐峰计算应不低于4000；其中对照品溶液的制备：精密称取血竭素高氯酸盐对照品5mg，置10mL棕色量瓶中，加3％磷酸甲醇溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1mL，置5mL棕色量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得，每1mL含血竭素高氯酸盐0.1mg，血竭素的重量＝血竭素高氯酸盐的重量/1.377；其中供试品溶液的制备：精密称取治疗妇科子宫肌瘤的药物组合物2.0g，置具塞锥形瓶中，精密加入3％磷酸甲醇溶液10～50mL，塞紧，摇匀，超声处理3～30分钟，功率300W，超声频率50KHz，滤过，精密量取续滤液1～5mL，置5～25mL棕色量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定即得；药物组合物每粒含血竭以血竭素计，不得少于0.50mg，血竭素的分子式C17H14O3。