[发明专利]一种温度两阶段控制策略发酵生产F.solani pisi角质酶的方法无效
申请号: | 200810022620.X | 申请日: | 2008-07-16 |
公开(公告)号: | CN101323848A | 公开(公告)日: | 2008-12-17 |
发明(设计)人: | 陈坚;吴敬;张芙华 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N9/16 | 分类号: | C12N9/16;C12R1/125 |
代理公司: | 无锡市大为专利商标事务所 | 代理人: | 时旭丹;刘品超 |
地址: | 214122江苏省无锡市蠡湖大道*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 一种温度两阶段控制策略发酵生产F.solani pisi角质酶的方法,属于环境因素分阶段控制策略在发酵过程优化中的应用技术领域。本发明采用分泌性表达载体重组芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WSHB 06-07为出发菌株,在菌体生长阶段控制温度37℃和pH为7.5,当菌体的OD600达到12.65时,将温度调至30℃和pH调至6.5直到发酵结束。采用此策略进行发酵,最终实现了提高角质酶产量和生产强度的目的。本发明的优点在于工艺简单易行,能有效地提高角质酶的产量及生产强度,并能够减少发酵液中杂蛋白的含量,提高了产品纯度和下游提取时的效率,并且减少了能耗,有利于工业化大规模生产。 | ||
搜索关键词: | 一种 温度 阶段 控制 策略 发酵 生产 solani pisi 角质 方法 | ||
【主权项】:
1、一种温度两阶段控制策略发酵生产F.solani pisi角质酶的方法,其特征是采用分泌性表达载体重组芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WSHB 06-07为出发菌株,两阶段控制策略发酵生产F.solani pisi角质酶:(1)菌体生长阶段控制温度为37℃、pH 7.5、搅拌转速600r/min、通气量为1.5vvm,直到菌体OD600达到12.65;(2)高效表达阶段当菌体OD600达到12.65,菌体生长进入对数生长期后,将发酵温度降到30℃、pH 6.5、搅拌转速600r/min、通气量为1.5vvm,直到发酵结束。
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