[发明专利]一种优良食味水稻的育种方法

摘要

本发明涉及一种优良食味水稻的育种方法，属水稻遗传改良与生物技术应用领域。选用江苏高产粳稻品种武香粳14与优质粳稻品种关东194杂交配组；F₄开始选择单株；F₅开始进行分子标记辅助选择，获得农艺性状稳定一致的优良食味品种南粳46，其暗胚乳突变基因型为Wx－mqWx－mq。育成携带该突变基因位点的水稻品种南粳46其胚乳外观呈云雾状、乳白色，透明度略差，其米饭质地粘软，表面光泽透亮，综合了糯米的柔性和粳米的弹性，冷饭不硬，食味品质极佳。在江苏、上海、浙江等晚粳稻地区具有广阔的应用前景。

主权项

1、一种优良食味水稻的育种方法，其特征在于：1)选用Wx位点上基因型为Wx-bWx-b的江苏高产粳稻品种武香粳14为母本(♀)与暗胚乳突变基因型为Wx-mqWx-mq(Wx-mq相对于Wx-b为隐性遗传)的优质粳稻品种关东194为父本杂交配组；2)种植F₁、F₂、F₃，成熟后全部单株混收；3)F₄开始选择株高100～110cm、每株8～10穗、每穗130～150粒的单株；4)F₅开始进行分子标记辅助选择，各世代在农艺性状稳定的小区移栽后30天采取单株叶片2～3片，用SDS法提取DNA，用CAPS标记序列进行PCR扩增：正向序列为TGTGGCTGAGGTAGGAGCA，反向序列为AACGCATCTGGTTGTCTTTGT；PCR反应体系：模板DNA 10ng/μl 1μl；引物对4pmol/μl 0.8μl；10×缓冲液1μl；MgCl₂25mM 0.6μl；dNTP 2.5mM 0.2μl；Taq酶5U/μl 0.1μl；ddH₂O 6.3μl；反应总量10μl；PCR反应在MJ Reseach PTC-200热循环仪上进行，反应程序包括：94℃预变性5min，每个循环94℃变性30sec，52.2℃退火30sec，72℃延伸1min，共35个循环，最后72℃延伸7min，12℃保存；酶切体系：PCR扩增产物2μl；10U NIaIII酶2μl；10×NEB Buffer4 2μl；100×BSA 0.2μl；ddH₂O 13.8μl；反应总量20μl；酶切反应在MJ Reseach PTC-200热循环仪上进行，37℃恒温4小时；酶切产物在1％琼脂糖上进行分离鉴定180V 1小时，溴化乙锭染色，然后在紫外凝胶成像仪上观察并拍照；酶切产物电泳检测显示有215bp和170bp两条谱带的为Wx-mq基因纯合体的水稻品种，据此确认暗胚乳突变基因型为Wx-mqWx-mq的小区；5)F₅开始只在基因型为Wx-mqWx-mq的小区选择株高100～110cm、每株8～10穗、每穗130～150粒的单株，F₇代获得农艺性状稳定一致的优良食味品种南粳46，其暗胚乳突变基因型为Wx-mqWx-mq，株高105～110cm，每株8～10穗，穗长16cm，直立穗型，每穗总粒数140～150粒，结实率90％～92％，千粒重25～26g。