[发明专利]酰乙基苯丙氨酸型镍亲合层析介质在纯化融合蛋白中的应用无效
| 申请号： | 200810024624.1 | 申请日： | 2008-03-28 |
| 公开（公告）号： | CN101270149A | 公开（公告）日： | 2008-09-24 |
| 发明（设计）人： | 刘晓宁;魏荣卿;张晓晓 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C07K1/22 | 分类号： | C07K1/22 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 210009江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种酰乙基苯丙氨酸型镍亲合层析介质(PS－Phe－Ni2+)在纯化融合蛋白中的应用。该介质对蛋白的纯化效果较好，且粗酶液不经过硫酸铵沉淀、透析等预处理，可直接用于亲合纯化，简化了纯化工艺。其主要步骤为：将融合蛋白溶液加入PS－Phe－Ni2+亲合层析介质中进行亲合吸附；用10－400mM咪唑浓度的磷酸缓冲液对介质进行梯度洗脱，收集每个浓度的洗脱液，经酶活测定并取微量用丙酮沉淀过夜后，进行SDS－PAGE电泳观察目的蛋白的洗脱位置及杂蛋白的洗脱情况。 | ||
| 搜索关键词： | 乙基 苯丙氨酸 型镍亲合 层析 介质 纯化 融合 蛋白 中的 应用 | ||
【主权项】：
1. 本发明涉及一种酰乙基苯丙氨酸型镍(PS-Phe-Ni2+)亲合层析介质在纯化融合蛋白中的应用。此方法包括以下两步：(1)融合蛋白溶液加入PS-Phe-Ni2+亲合层析介质中进行亲合吸附；(2)用不同咪唑浓度的缓冲液对介质进行梯度洗脱，收集每个浓度的洗脱液。
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