[发明专利]一种固定化米糠谷氨酸脱羧酶富集γ－氨基丁酸的制备方法

摘要

一种固定化米糠谷氨酸脱羧酶富集γ－氨基丁酸的制备方法，属于米糠精深加工技术领域。本发明以稻谷加工后的副产物－米糠为原料，经粉碎、过筛、与一定浓度的海藻酸钠溶液混合并搅拌均匀，装入制球设备并逐滴滴入CaCl₂溶液中成球，硬化球体，清洗多余CaCl₂和未被固定化的米糠，得固定化米糠谷氨酸脱羧酶；将此酶与PBS缓冲溶液混合，并加入0.01－0.05mol/l的谷氨酸钠作为底物，45℃摇床反应得γ－氨基丁酸富集液，烘干即得产品；其蛋白质含量和糖含量仅为传统的直接利用米糠富集γ－氨基丁酸法所得产品的1/10，可作为功能性食品添加剂使用，具有降血压、镇静、助眠、保肝等功效。本发明方法设计科学合理，对实现米糠资源的综合利用和提高其附加值具有重要的意义。

主权项

1、一种固定化米糠谷氨酸脱羧酶富集γ-氨基丁酸的制备方法，其特征是先将米糠粉碎、过筛，与一定浓度的海藻酸钠溶液混合并搅拌均匀，装入制球设备并逐滴滴入CaCl2溶液中成球，硬化球体，清洗多余CaCl2和未被固定化的米糠，得固定化米糠谷氨酸脱羧酶；将此酶与PBS缓冲溶液混合，并加入0.01-0.05mol/L的谷氨酸钠作为底物，45℃摇床反应得γ-氨基丁酸富集液，烘干即得产品；(1)米糠粉碎、过筛：先将米糠进行粉碎，要求过60目筛网；(2)过筛后米糠与海藻酸钠溶液混合：先配制质量浓度为2％的海藻酸钠溶液，海藻酸钠溶解完全后加入过筛米糠，使过筛米糠质量浓度控制6％，搅拌均匀，得混合液；(3)制球：配制质量浓度为1％的CaCl2溶液，保持溶液搅拌流动；将上步骤(2)的混合液装进制球设备，保持1滴/s的滴出速度，在距液面10cm处滴入CaCl2溶液中，立即成球；(4)硬化：保持CaCl2溶液流动，以使其中的球体悬浮，1h后倾去CaCl2 溶液；(5)清洗：以等于CaCl2溶液体积的去离子水替换CaCl2溶液，保持搅拌，清洗球体，共换三次水，每次搅拌20min；(6)润洗：将去离子水换为PBS缓冲溶液，保持搅拌，润洗球体，共换两次PBS缓冲溶液，每次搅拌20min，得固定化谷氨酸脱羧酶；(7)反应：以固定化谷氨酸脱羧酶∶PBS缓冲溶液质量比控制为3∶4的比例于保温容器中，按0.01-0.05mol/L的浓度加入谷氨酸钠，保持搅拌反应，温度45℃，反应12小时后，得反应液；(8)烘干：除去反应液中的水分，即得富集γ-氨基丁酸产品。