[发明专利]一种柔嫩艾美耳球虫蛋白激酶基因的克隆、表达及应用无效
| 申请号： | 200810037194.7 | 申请日： | 2008-05-09 |
| 公开（公告）号： | CN101575606A | 公开（公告）日： | 2009-11-11 |
| 发明（设计）人： | 韩红玉;黄兵;林矫矫;赵其平;董辉;姜连连;颜彦;姚倩;樊玉娟;李玉剑 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院上海兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N15/54 | 分类号： | C12N15/54;C12N9/12;C12N15/10;C12N15/70;A61K38/45;A61K39/00;A61P33/02 |
| 代理公司： | 上海新天专利代理有限公司 | 代理人： | 王 巍 |
| 地址： | 200232上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)的一种新蛋白激酶(EtPK)基因，克隆号：ZB1-A02，全长1684bp，含有一个1527bp的ORF，编码508个氨基酸(Genbank登录号EF552216)。本发明将该基因连接到原核表达载体pGEX-4T-2，构建了原核表达重组质粒pGEX-4T-EtPK，并在大肠杆菌系统中进行了表达，表达的重组蛋白以包涵体形式存在。通过纯化重组蛋白4T-EtPK进行SDS-PAGE，再转移至PVDF膜上，用E.tenella卵囊口服免疫鸡的抗血清作为-抗，羊抗鸡IgG作为二抗进行Western-blot分析，表明它有一定的抗原性，能用于研制抗鸡球虫病药物和制备抗鸡球虫病疫苗。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 柔嫩 艾美耳球虫 蛋白激酶 基因 克隆 表达 应用 | ||
【主权项】：
1、一种柔嫩艾美耳球虫蛋白激酶基因，其特征在于所述该柔嫩艾美耳球虫蛋白激酶基因具有下列序列：AGAACGAGTTGTTGCCAATGGAGAGTCCACCAGTAAGCTTTCCCGAGGCAGTGCCTGGTGCGTACTCCGAAAGTGCTAAGGCCCCTATAGAGAAGCCAAAGAACAAAGTAACAAACGAAGCAGAGGGAGATGACAGCAATGCTTTCTTCCTAAACGCGCGGCCTGGCCGACGGCAGCAGCGGCAAGTTGGCTCGCGCGTTGCTCTGGGTTTTGGCCTGATGTTTTCCGGCCTTGTTGCAGCTATCCTATCTAGCCTGCTGTTGCGGCAGCTCCAAGAACCTCCCCGAGTCAACCTGTCCAACGCATGGCAGCAGCTGGAGTCGCAGGAGGCGACGTGGCTGCTTCCTACTGTAGACCAGCAAGAAGTAGCGGCTCACCCTCGCTTGGCCATGGGTAAATGGTTGCTTGCAGATGCAGTTAACTTTAGGCAAGCAGCTGACATGCAGTGGCGGGGCCCGCTAGGCCGGGAGTTAATGCTCGTTCTTGCTGAGCACCTCACAAAGGGAAGGTCAAGCAGTGTGATAGGCGCCACGATCAACTTGGTAAACACGCAGCAGTTAGGTTATCCTGAAGTCGACCCAACCCCACACCCTTTTACCATAAAGCGCTATCTATATGAAGACAATGAGTCTGTTACCTTGGAGATAGTAGATCAAGCAACGAATTTGCCTTATGCCATGCGGCTGCGCACCGTGCGACCTCGCGTCCACGGTGAGGACGTGCTGCCAGAGACAGCGGAGGAACTGAATCAGCGGTCCTTGGTGGGGACCACTAGCTCTATGCTTCAgGCAATTGGGGAGTCGGATCTGCGAGACGCAGCAGAGGAGAGGGGCTTGGCTGTTGCATCTGCCGTTGCTACGATCCAAGGCGTGCCCACGGTCATGCGCGGCAGTACTGTTTACCTGGTGGCTGACGTTGAGCTGGGTGAGGTTTACAGCGGTCGCTTGAGTGATATATTCGCAGCAGGGACTGCTGCCTCTTTGGAGGCTAAGGAGCACGCAGCGAGCCGAATGCTGCTGCAGGTGTTGCAGTTGCAGCACGCCCGATTCAGCCACAACAATCTGAAGCTTGAAAACTTTTTCATGCGGCCAGACGGCTCTTTTCTACTGGGAAACTTTGGCACTGGTACCCCCATAGGCGAGCGCCTAGACAGAGTCAGCGCTGTGGACCCAAAATATGCGGAGATGGAGCTAGGTGCCAACGCTGCAGCTGCTGAGGCTGAGGGGGAGGAAGATCTCGCCAAACCTGTAGTTGACGAGAAGTCGGATATGTGGGGCTTGGGTGTTTGTCTATACAAAATATTCACAGGCGGCGATATGCCTTTTGACCTGGCCTCAGAAGACCCTCCTGCATCCGTCTTCTCGTTTATGAAGGAACACAGAATGAGCGGGCAGGCGCTGCGTGGTCGGCTGACAGATTTGGGGGTGCCTGTCAGGTGGCAGGAATTAATTACAGGCCTCTTGGAGATTGATAGAGACGACAGACTGGACGCAGAAACGGTGTCCAGGGAGTTCCAGGATCTTCTACACCTGCGGGGTGTGTAGCCGTAAAGATTGGGACGCAGTTCATAATGGCGACCTACTGGTATTTTATGATCTTGGGATGGGAGCGTCAGCGTCACTGGCACGGTGGATGTTCAGGTGACACCAGTTTACTCTTCAATTACGAACCCAAGAAACTTTGA；所述ATG为起始密码子；TAG为终止密码子。
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