[发明专利]扩增抗体重链前导序列及可变区基因序列的方法及其引物无效
| 申请号： | 200810037428.8 | 申请日： | 2008-05-15 |
| 公开（公告）号： | CN101580831A | 公开（公告）日： | 2009-11-18 |
| 发明（设计）人： | 孙兵;王茜 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海生命科学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 | 代理人： | 范 征 |
| 地址： | 20003*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种特别适合于扩增单克隆抗体重链基因的引物，所述的引物具有SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示的序列。所述的引物适用于多种类型的单克隆抗体重链可变区的扩增，包括IgG1，IgG2a，IgG2b等抗体亚型。本发明还公开了一种获得单克隆抗体重链基因的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 扩增 抗体 前导 序列 可变 基因 方法 及其 引物 | ||
【主权项】：
1.一种获得单克隆抗体重链基因的方法，其特征在于，所述方法包括：(1)以SEQ ID NO：1所示序列为引物，以杂交瘤细胞的RNA为模板，进行反转录，获得cDNA；(2)在反转录获得的cDNA的3’末端加上多聚N，获得加尾产物；其中N是选自A、T、C或G之一的碱基，N的个数是5-120个；(3)以SEQ ID NO：2所示序列和多聚M为引物，以加尾产物为模板，进行PCR扩增，获得扩增产物；其中M是选自A、T、C或G之一且与N互补配对的碱基，M的个数是10-40个；和(4)从扩增产物中分离获得单克隆抗体重链基因。
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